Microplate Technique for Rh (D) antigen by using diluted anti – D in normal saline medium

Abstract

Background : Micro plate  technique  is  used  for  routine  blood  processing  in  blood  bank  for  mass  testing,  saving reagents  and  reducing  time.

Objective : The  micro plate  technique  is  used  for  detecting  Rh (D) antigen  on  red  blood  cells  by using  normal  saline  solution  (NSS)  medium  in  stead  of  enzyme  solution  to  save  the  cost  of  enzyme  reagent  and  reduce  processing  time.

Design: Laboratory.

Setting : Blood  Transfusion Center,  Faculty  of  Medicine, Khon Kaen University.

Subject: A total  of  11,379 blood samples  from  blood donors  who  donated  blood  to  the  Blood  Transfusion  Center,  during  October  1996-May 1997 were  sused  for  the  study.

Methods: Micro plate  Rh-D  typing  was  performed  by  diluting  anti-D  in  NSS  medium in comparison  to  routine one-stage enzyme  technique. One percent approximately of  red  cell  solution  was  prepared  by  the  stick  method  in  25  microlitre  NSS  in  a  V-type micro plate  well.  Twenty  five  microlitre  of 1:200  diluted  anti-D was added.  The  result  was  read  by  the  naked eye after  incubation  at  room  temperature  for  one  hour.

Results: Both techniques  demonstrated  concordant  results for  typing  of  Rh (D)  antigen  in  all  of  11,379 blood  samples. There were  11,352 Rh-D positive  and 27 Rh-D negative.

Conclusions: This micro plate  technique  is  easily  performed  for  detection  of  Rh(D) antigen  without  using  enzyme  reagent. It gives  high  sensitivity  and  specificity  of  100%  and  reduces  the  cost  of  enzyme  reagent  and  the  time  for  enzyme  solution  preparation.  Therefore,  this  micro plate  technique  using  diluted  anti-D  in  NSS  reaction  can  be  used  for  Rh (D)  detection  in  any blood  bank  which  has alarge number of blood donors.

Key word : Microplate * Rh (D) antigen.