The molecular marker of exposure in the horn snail (Cerithidea cingulata) for determining 17β-estradiol (E2) contamination in aquatic environments

Abstract

ทำการค้นหาเครื่องหมายทางชีวภาพเพื่อใช้ตรวจสอบการปนเปื้อนของสารในกลุ่ม Endocrine Disrupting Chemicals (EDCs) ในสิ่งแวดล้อมทางน้ำด้วยเทคนิค cDNA-AFLP กับหอยเจดีย์ (Cerithidea  cingulata) ตัวเต็มวัยที่ได้รับสาร 17β-estradiol (E₂) โดยวิธีการแช่ที่ความเข้มข้น 100 ng/L เปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมที่ไม่ได้รับสาร E₂ สามารถคัดเลือกแถบดีเอ็นเอ 1 แถบที่ปรากฏในกลุ่มที่ได้รับสาร E₂ คือ “217_AFLP” เมื่อแปลรหัสเป็นกรดอะมิโนแล้วเทียบเคียงกับฐานข้อมูล GenBank ณ เดือนมีนาคม 2555 พบว่ามีความเหมือนสูงสุด (46% Identities; 32/72) กับยีน transposase ของปู  Marbled crab (Pachygrapsus marmoratus) (GenBank accession no. CAJ76996) และเมื่อศึกษาระดับการแสดงออกของ “217_AFLP” ในเนื้อเยื่อส่วนเท้าของหอยเจดีย์ตัวเต็มวัยด้วยปฎิกิริยา semi-quantitative PCR ที่ใช้ยีนควบคุมภายใน 28S rRNA พบว่าทั้งหอยเจดีย์เพศเมียและเพศผู้ที่ได้รับสาร E₂ ที่ความเข้มข้น 10 ng/L เป็นเวลานาน 7 วัน  มีการแสดงออกของ “217_AFLP” เท่ากับ 1.45±0.06 และ 1.27±0.18 ตามลำดับ แตกต่างจากกลุ่มควบคุม (0.45±0.01 และ 0.61±0.06 ตามลำดับ) อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (p<0.05)  ดังนั้นเครื่องหมายดีเอ็นเอ “217_AFLP” สามารถใช้ติดตามตรวจสอบการปนเปื้อนของสาร E₂ ในสิ่งแวดล้อมทางน้ำได้