Detection of Contaminated Bacteria in Frozen Minced Pork Using Multiplex Polymerase Chain Reaction Technique
DOI:
https://doi.org/10.14456/tjg.2009.4Keywords:
multiplex PCR, bacterial detection, food-born pathogenic bacteriaAbstract
Multiplex polymerase chain reaction (mPCR) technique without DNA extraction was developed for detection of pathogenic bacteria in frozen minced pork. Five primer pairs were designed for amplification of target DNA fragments of 5 bacterial species namely Campylobacter fetus, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Salmonella enterica serovar Typhi and Vibrio cholerae. The results showed that the new method of multiplex PCR technique in this study was specific to the target bacteria with sensitivity at 104 cells/g.
References
นฤมล ธนานันต์ และ ธีระชัย ธนานันต์. 2551. การตรวจสอบแบคทีเรีย E. coli. ในน้ำด้วยเทคนิคดูเพล็กซ์พีซีอาร์. Thai J Genet 1: 109-113.
นฤมล ธนานันต์ และ ธีระชัย ธนานันต์. 2552. การประยุกต์เทคนิคพีซีอาร์เพื่อตรวจสอบแบคทีเรียซัลโมเนลลาในน้ำดื่ม. ว. วิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี 17: 37-42.
ภาวิน ผดุงทศ. 2547. แบคทีเรียก่อโรคในอาหาร. เชียงใหม่สัตวแพทยสาร 2: 51-65.
Chiu, T.H., Chen, T.R., Hwang, W.Z. and Tsen, H.Y. 2005. Sequence of an internal transcribed spacer region of 16S-23S rRNA gene and designing of PCR primers for the detection of Salmonella spp. in food. Int J Food Microbiol 97: 259-265.
Fode-Vaughan, K.A., Maki, J.S., Benson, J.A. and Collins, M.L.P. 2003. Direct PCR detection of Escherichia coli O157:H7. Lett App Microbiol 37: 239-243.
Kong, R.Y.C., Lee, S.K.Y., Law, T.W.F., Law, S.H.W. and Wu, R.S.S. 2002. Rapid detection of six types of bacterial pathogens in marine waters by multiplex PCR. Water Res 36: 2802-2812.
Stoyanchev, T.T. 2004. Detection of Campylobacter using standard culture and PCR of 16S rDNA gene in freshly chilled poultry and poultry products in a slaughterhouse. Trakia J Sci 2: 59-64.
Tantawiwat, S., Tansuphasiri, U., Wongwit, W., Wongchotigul, V. and Kitayaporn, D. 2005. Development of multiplex PCR for the detection of total coliform bacteria for Escherichia coli and Clostridium perfringens in drinking water. Southeast Asian J Trop Med Public Health 36: 162-169.
Yeon, S.P., Sang, R.L. and Young, G.K. 2006. Detectin of Escherichia coli O157:H7, Salmonella spp., Staphylococcus aureus and Listeria monocytogenes in kimchi by multiplex polymerase chain reaction (mPCR). J Microbiol 44: 92-97.
