การพัฒนาและตรวจสอบความใช้ได้ของวิธีวิเคราะห์โอคราทอกซิน เอ ในธัญพืชด้วยเทคนิค High Performance Liquid Chromatography - High Resolution Mass Spectrometry

บทคัดย่อ

งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนาวิธีวิเคราะห์สารโอคราทอกซิน เอ ในธัญพืช ดัดแปลงจากวิธีมาตรฐาน AOAC (2016) 2000.03 โดยใช้เทคนิค High Performance Liquid Chromatography - High Resolution Mass Spectrometry (HPLC-HRMS) ปัจจัยที่ใช้ในการศึกษาภาวะที่เหมาะสมสำหรับวิเคราะห์สารโอคราทอกซิน เอ ด้วย HPLC-HRMS คือ โหมดไอออน (ไอออนบวกและไอออนลบ) และอัตราส่วนคงที่ของเฟสเคลื่อนที่ระหว่าง 0.1%formic acid in water (v/v) และ acetonitrile (20:80, 30:70 และ 40:60) จากการศึกษาพบว่า การใช้โหมดไอออนลบ และอัตราส่วนคงที่ระหว่าง 0.1% formic acid in water (v/v) และ acetonitrile ในเฟสเคลื่อนที่อัตราส่วน 30: 70 เป็นภาวะที่เหมาะสมสำหรับวิเคราะห์สารโอคราทอกซิน เอ จากนั้นตรวจสอบความใช้ได้ของวิธีวิเคราะห์เพื่อให้มั่นใจได้ว่าวิธีมีความถูกต้องและน่าเชื่อถือพบว่า ช่วงการใช้งานของการวิเคราะห์ (Working Range) อยู่ในช่วง 0.50 – 20 ไมโครกรัม/กก. ขีดจำกัดของการตรวจพบ (Limit of Detection) และขีดจำกัดของการวัดเชิงปริมาณ (Limit of Quantitation) มีค่าเท่ากับ 0.20 และ 0.50 ไมโครกรัม/กก. ตามลำดับ ความแม่นยำ (Accuracy) และความเที่ยงตรง (Precision) ของปริมาณที่วิเคราะห์อยู่ในเกณฑ์ยอมรับได้ (%Recovery 72.54 - 116.60, %RSD 13.10-13.69) ดังนั้นสามารถนำวิธีที่พัฒนาขึ้นมาไปใช้ในการวิเคราะห์หาปริมาณสารโอคราทอกซิน เอ ในธัญพืชได้โดยมีความแม่นยำในระดับที่ต่ำกว่าขีดกำหนดของมาตรฐานของประเทศผู้นำเข้า ปัจจุบันวิธีดังกล่าวได้ใช้เป็นวิธีมาตรฐานของห้องปฏิบัติการกองพัฒนาระบบและรับรองมาตรฐานสินค้าพืชกรมวิชาการเกษตร และได้รับการรับรองมาตรฐานห้องปฏิบัติการ ISO/IEC 17025 จากสำนักมาตรฐานห้องปฏิบัติการ กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์