การวินิจฉัยความแตกต่างระหว่างเชื้อมายโคพลาสมา สาเหตุโรคใบขาวอ้อยและหญ้าแพรก ด้วยวิธี ELISA และ SDS-PAGE

บทคัดย่อ

การทดลองทำที่เมืองอีสท์มอลลิ่ง ประเทศอังกฤษ ในปี 2532 - 2533 โดยนำท่อนพันธุ์อ้อยที่เป็นโรคใบขาว และหญ้าแพรกใบขาวในธรรมชาติ ไปปลูกในโรงต้นไม้ทดลอง และใช้อ้อยและหญ้าแพรกที่เป็นโรคดังกล่าว เป็นแหล่งของโรคซึ่งใช้แยกให้ได้โปรตีนของมายโคพลาสมาหรือแอนตีเจน ผลิตแอนตีซีรัมของเชื้อมายโคพลาสมาสาเหตุของโรคแต่ละชนิด เมื่อทดสอบปฏิกิริยากับแอนตีเจนหรือน้ำคั้นจากใบอ้อยเป็นโรคโดยวิธี F(ab')2 indirect enzyme-limked immunsorbent assays (ELISA) ปรากฎว่า แอนตีซีรัมของเชื้อมายโคพลาสมาแยกจากโรคใบขาวอ้อยจะทำปฏิกิริยาเฉพาะกับน้ำคั้นจากอ้อยเป็นโรคใบขาว และแอนตีซีรัมของเชื้อมายโคพลาสมาแยกจากโรคใบขาวหญ้าแพรก จะทำปฏิกิริยาเฉพาะกับน้ำคั้นจากหญ้าแพรกเป็นโรคใบขาวแอนตีซัมรัมทั้งสองชนิดไม่ทำปฏิกิริยากับแอนตีเจนต่างชนิด เมื่อใช้โปรตีนของมายโคพลาสมาจากอ้อยใบขาวและ จากหญ้าแพรกใบขาว มาแยกโดยวิธี sodium doeeyl polyacrylamide gel clectrophoresis (SDS-PAGE) และ western blot ปรากฎว่ามายโคพลาสมาแต่ละชนิดจะมีโปรตรีนสำคัญหนึ่งชีวิต ซึ่งมีน้ำหนักโมเลกุลต่างกัน คือ 21 kd สำหรับอ้อยใบขาว และ 19 kg สำหรับหญ้าแพรกใบขาว โปรตีนของมายโคพลาสมาแต่ละชนิดจะทำปฏิกิริยาเฉพาะเจาะจงกับแอนตีบอดีของโปรตีนนั้น ๆ เท่านั้น จากปฏิกิริยาเฉพาะเจาะจงจากวิธี ELISA, western blot และจากระยะทางการเคลื่อนที่ใน PAGE แสดงว่าเชื้อมายโคพลาสมาสาเหตุโรคใบขาวอ้อย และโรคใบขาวหญ้าแพรกเป็นเชื้อต่างชนิดกัน