การพัฒนาเพื่อลดต้นทุนการผลิตชุดทดสอบการตกค้างยาปฏิชีวนะในน้ำนมดิบ
Main Article Content
บทคัดย่อ
จุดประสงค์ของการศึกษาเพื่อพัฒนาชุดทดสอบการตกค้างของยาปฏิชีวนะในน้ำนมดิบ โดยใช้หลักการผลิตโยเกิร์ต กระบวนการศึกษาเริ่มต้นด้วยการเก็บตัวอย่างน้ำจากน้ำพุร้อน 3 พื้นที่ ในเขตจังหวัดราชบุรี และกาญจนบุรี เชื้อทั้ง 3 แหล่ง ถูกนำมาตรวจหาสายพันธุ์ด้วยวิธี Polymerase Chain Reaction (PCR) และความไวของเชื้อต่อยาปฏิชีวนะด้วยการหา Minimum Inhibitory Concentration (MIC) และ Minimum Bactericidal Concentration (MBC) เพื่อการคัดเลือกสายพันธุ์ที่จะเป็นตัวแทนในการใช้พัฒนาชุดทดสอบต่อไป ผลการทดสอบ พบว่าเชื้อมีความสอดคล้องกับ Geobacillus stearothermophilus ถึง 97% การบ่มเชื้อ G. stearothermophilus กับน้ำนมที่ปราศจากเชื้อที่อุณหภูมิ 64°C เป็นเวลา 18-20 ชั่วโมง สามารถให้ปริมาณสปอร์สูงสุดได้ที่ 107 CFU/mL และต่ำสุดที่ 105 CFU/mL และชุดทดสอบที่มีปริมาณสปอร์ 106 CFU/mL ปรับ pH 9.5 จะให้ผลการทดสอบชัดเจน ณ ชั่วโมงที่ 5 เมื่อบ่มที่ 64 ͦ C เมื่อทำการทดสอบกับน้ำนมที่มีการผสมยาปฏิชีวนะทั้ง 5 ชนิด เพื่อหาค่า detection limits พบว่า Amoxycillin, Penicillin, Ampicillin, Ceftiofur และ Oxytetracycline ถูกตรวจพบได้ปริมาณต่ำสุดที่ 4, 8, 8, 100 และ 200 µg/l ซึ่งใกล้เคียงกับมาตรฐานการตกค้างของยาปฏิชีวนะในน้ำนมดิบที่กำหนดโดย Codex Alimentarius International Food Standards และ Australian Pesticides and Veterinary Medicines Authority
Article Details

อนุญาตภายใต้เงื่อนไข Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.
เอกสารอ้างอิง
Australian Pesticides and Veterinary Medicines Authority (APVMA). 2017. Agricultural and Veterinary Chemicals Code Instrument No. 4 (MRL Standard) 2012: 283 pages.
Guizelini, B.P., L.P.S. Vandenberghe, S.R.B.R. Sella, C.R. Soccol. 2012. Study of the influence of sporulation conditions on heat resistance of Geobacillus stearothermophilus used in the development of biological indicators for steam sterilization. Arch Microbiol. DOI 10.1007/s00203-012-0832-z.
Burgess, S. 2016. Characterisation of dairy strains of Geobacillus stearothermophilus and a genomics insight into its growth and survival during dairy manufacture. PhD thesis. Massey University. New Zealand. 248 pages.
Burgess, S.A., S.H. Flint, D. Lindsay, M.P. Cox, and P.J. Biggs. 2017. Insights into the Geobacillus stearothermophilus species based on phylogenomic principles. BMC Microbiology. 17(140): 1-12.
Chinpan, K. 2003. Development of microbiological test kit for detection of antibiotic residues in milk. MS Thesis. Chulalongkorn University, Bangkok. (in Thai)
Codex Alimentarius International Food Standards (CIAFS). 2018. Maximum residue limits (MRLs) and risk management recommendations (RMRs) for residues of veterinary drugs in foods CX/MRL 2-2018: 46 pages.
Coorevits, A., A.E. Dinsdale, G. Halket, L. Lebbe, P.D. Vos, A.V. Landschoot, and N.A. Logan. 2012. Taxonomic revision of the genus Geobacillus: emendation of Geobacillus, G. stearothermophilus, G. jurassicus, G. toebii, G. thermodenitrificans and G. thermoglucosidans (nom. corrig, formerly ‘thermoglucosidasius’); transfer of Bacillus thermantarcticus to the genus as G. thermantarcticus comb. nov.; proposal of Caldibacillus debilis gen. nov., comb. nov.; transfer of G. tepidamans to Anoxybacillus as A. tepidamans comb. nov.; and proposal of Anoxybacillus caldiproteolyticus sp. nov. Int J Syst Evol Microbiol 62: 1470–1485.
Department of Livestock Development (DLD). 2010. Standard methods for the examination of dairy products. Bangkok. Thailand. (in Thai)
Gaudin, V. 2017. State of the art in the validation of screening methods for the control of antibiotic residues: is there a need for further development?. Food Addit Contam Part A 34(9): 1528–1552.
Gondová, Z., I. Kožárová, Z. Poláková, and M. Mad’arová. 2014. Comparison of four microbiological inhibition tests for the screening of antimicrobial residues in the tissues of food-producing animals. Ital J Anim Sci 13(3521): 728-734.
Stephen L.A.H. and J. Faragher. 2012. Validation of the Delvotest SP NT DA Performance Tested MethodSM 011101. Journal of AOAC International. 95(1): 252-259.
Jayalakshmi, K., M. Paramasivam, M. Sasikala, and A. Sumithra. 2017. Review on antibiotic residues in animal products and its impact on environments and human health. J Entomol Zool Stud 5(3): 1446-1451.
Kirchman, D.L., L. Yu, and M.T. Cottrell. 2003. Diversity and abundance of uncultured cytophaga-like bacteria in the Delaware Estuary. Appl Environ Microbiol 69(11): 6587–6596.
Kotzekidou, P. 2014. Geobacillus stearothermophilus (Formerly Bacillus stearothermophilus). Encyclopedia of Food Microbiology 1: 129-134.
National Bureau of Agricultural Commodity and Food Standards (NBACFS). 2017. Guidance in the application of Thai agricultural standard: good manufacturing practices for milk collection center. Ministry of Agriculture and Cooperatives. (in Thai)
Novik G., V. Savich, and O. Meerovskaya. 2018. Geobacillus bacteria: potential commercial applications in industry, bioremediation, and bioenergy production. In: Growing and handling of bacterial cultures. 36 pages.
Phiriyayon. S., W. Jantaramongkon, and S. Aimhun. 2016. Development of test kit for antibiotic determination in animal feed production by microbiological assay. BQCLP E-JOURNAL. 8(1): 266-296. (in Thai)
Priyanka, S. Panigrahi, M. Sheoran, and S. Ganguly. 2017. Antibiotic residues in milk- a serious public health hazard. J Environ Life Sci 2(4): 99-102.
Rueda, T.R. 2015. Evaluation of false positive results in microbial inhibitor tests for screening antibiotics in goat milk. Ph.D. Thesis. Universitat Politècnica de València. Spain. 196 pages.
Sumpradit, N., S. Suttajit, S. Poonpolsub, R. Chuanchuen, and P. Prakongsai. 2015. Landscape of antimicrobial resistance situation and action in Thailand. 1st ed. Bangkok: Aksorn Grphic and Design Publishing Limited Partnership. 143 pages. (in Thai)
Suriyasathaporn W., V. Chupia, T. Sing-Lah, K. Wongsawan, R. Mektrirat, and W. Chaisri. 2012. Increases of antibiotic resistance in excessive use of antibiotics in smallholder dairy farms in northern Thailand. Asian-Australasian J Anim Sci 25(9): 1322-1328.
Tangmunkhong, P., S. Viriyarampa, S. Cumsing, and P. Jala. 2007. New test kit for detection antibiotic residue in milk. Proceedings of the 45th Kasetsart University Annual Conference: Animals and Veterinary Medicine, Bangkok, Thailand. 30 Jan - 2 Feb 2007: 458-463. (in Thai)
Yamaniu, M.I., L.M.A. Al-Kurd, M.S.Y. Haddadi, and R.K. Robinson. 1999. A simple test for the detection of antibiotics and other chemical residues in ex-farm milk. Food Control 10: 35-39.
Yazdany, S. and K.B. Lashkari. 1975. Effect of pH on sporulation of Bacillus stearothermophilus. Appl Microbiol 30(1): 1-3.