การพัฒนาเทคนิค Loop-Mediated Isothermal Amplification สำหรับการตรวจ ไวรัสฟาล์วอะดีโนไวรัสซีโรไทป์ 2 สาเหตุโรคอินคลูชันบอดี เฮปาไตติส

Main Article Content

สกุณา พัฒนกุลอนันต์
สิริลักษณ์ จาละ
สุวิมล พันธุ์ดี
ปรีดา เลิศวัชระสารกุล
สิทธิณี กุลประเสริฐศรี

บทคัดย่อ

โรคอินคลูชันบอดี เฮปาไตติส (inclusion body hepatitis; IBH) เป็นโรคที่ก่อให้เกิดอัตราการตายสูงในลูกไก่ส่งผลให้เกิดความเสียหายต่ออุตสาหกรรมการผลิตสัตว์ปีกทั่วโลก ประเทศไทยพบการระบาดของโรค IBH ครั้งแรกในปี ค.ศ. 2007 มีสาเหตุเกิดจากฟาล์วอะดีโนไวรัสซีโรไทป์ 2 การศึกษาครั้งนี้จึงได้พัฒนาเทคนิค Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) ในการตรวจหาฟาล์วอะดีโนไวรัสซีโรไทป์ 2 ในการศึกษาได้ออกแบบไพรเมอร์จำนวน 4 เส้นที่มีความจำเพาะต่อยีน hexon ของฟาล์วอะดีโนไวรัสซีโรไทป์ 2 ผลการทดสอบพบว่าอุณหภูมิ 63 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 นาที ให้ผลการตรวจสอบที่ชัดเจนที่สุด การแปลผลสามารถอ่านผลได้ด้วยตาเปล่าจากการเติม SYBR Green I และไม่พบการทำปฏิกิริยากับสารพันธุกรรมของไวรัส chicken anemia virus (CAV), Newcastle disease virus (NDV), duck plaque virus (DPV), infectious bronchitis virus (IBV) และ egg drop syndrome virus (EDSV) เทคนิคที่พัฒนาขึ้นในครั้งนี้สามารถตรวจพบไวรัสต่ำสุดที่ 10 copy number/µl ซึ่งมีความไวมากกว่าเทคนิค PCR ถึง 1000 เท่า การศึกษานี้สรุปได้ว่าเทคนิค LAMP ที่พัฒนาขึ้นเป็นเทคนิคที่เหมาะสำหรับการตรวจวินิจฉัยโรค IBH ที่มีสาเหตุมาจากฟาล์วอะดีโนไวรัสซีโรไทป์ 2 เนื่องจากเป็นเทคนิคที่ง่าย สะดวก รวดเร็ว ไม่ต้องอาศัยเครื่องมือราคาแพงในการทดสอบและแปลผล ประกอบกับเป็นเทคนิคที่มีความจำเพาะและความไวสูงจึงเป็นเทคนิคที่เหมาะเป็นอย่างยิ่งกับการปฏิบัติงานภาคสนาม

Article Details

บท
บทความวิจัย

References

Abghour, S., Zro, K., Mouahid, M., Tahiri, F., Tarta, M., Berrada, J., & Kichou, F. (2019). Isolation and characterization of fowl aviadenovirus serotype 11 from chickens with inclusion body hepatitis in Morocco. PLoS ONE, 14(12).

Chitradevi, S., Sukumar, K., Suresh, P., Balasubramaniam, G. A., & Kannan, D. (2021). Molecular typing and pathogenicity assessment of fowl adenovirus associated with inclusion body hepatitis in chicken from India. Tropical Animal Health and Production, 53(4).

Domanska-Blicharz, K., Tomczyk, G., Smietanka, K., Kozaczynski, W., & Minta, Z. (2011). Molecular characterization of fowl adenoviruses isolated from chickens with gizzard erosions1. Poultry Science, 90(5), 983–989.

Garmyn, A., Bosseler, L., Braeckmans, D., Van Erum, J., & Verlinden, M. (2018). Adenoviral Gizzard Erosions in Two Belgian Broiler Farms. Avian Diseases, 62(3), 322–325.

Goto, M., Honda, E., Ogura, A., Nomoto, A., & Hanaki, K. I. (2009). Colorimetric detection of loop-mediated isothermal amplification reaction by using hydroxy naphthol blue. BioTechniques, 46(3), 167–172.

Grafl, B., Aigner, F., Liebhart, D., Marek, A., Prokofieva, I., Bachmeier, J., & Hess, M. (2012). Vertical transmission and clinical signs in broiler breeders and broilers experiencing adenoviral gizzard erosion. Avian Pathology, 41(6), 599–604.

Iwamoto, T., Sonobe, T., & Hayashi, K. (2003). Loop-mediated isothermal amplification for direct detection of Mycobacterium tuberculosis complex, M. avium, and M. intracellulare in sputum samples. Journal of Clinical Microbiology, 41(6), 2616–2622.

Junnu, S., Lertwatcharasarakul, P., Jala, S., Phattanakulanan, S., & Monkong, A. (2015). An Inactivated Vaccine for Prevention and Control of Inclusion Body Hepatitis in Broiler Breeders. The Thai Journal of Veterinary Medicine, 45(1), 16.

Kasantikul, T. (2011). Development of In Situ Hybridization Technique for Detecting Fowl Adenovirus in Chicken Tissues. Ms.D. Kasetsart University.

Kim, M. S., Lim, T. H., Lee, D. H., Youn, H. N., Yuk, S. S., Kim, B. Y., Choi, S. W., Jung, C. H., Han, J. H., & Song, C. S. (2014). An inactivated oil-emulsion fowl Adenovirus serotype 4 vaccine provides broad cross-protection against various serotypes of fowl Adenovirus. Vaccine, 32(28), 3564–3568.

Lai, V. D., Min, K., Lai, H. T. L., & Mo, J. (2021). Epidemiology of fowl adenovirus (FAdV) infections in South Korean chickens during 2013–2019 following introduction of FAdV-4 vaccines. Avian Pathology, 50(2), 182–189.

Manarolla, G., Pisoni, G., Moroni, P., Gallazzi, D., Sironi, G., & Rampin, T. (2009). Short communications adenoviral gizzard erosions in Italian chicken flocks. Veterinary Record, 164(24), 754–756.

Mase, M., Hiramatsu, K., Nishijima, N., Iguchi, H., Honda, S., Hanyu, S., Iseki, H., & Watanabe, S. (2020). Fowl Adenoviruses Type 8b Isolated from Chickens with Inclusion Body Hepatitis in Japan. Avian Diseases, 64(3), 330–334.

Meulemans, G., Boschmans, M., Van den Berg, T. P., & Decaesstecker, M. (2001). Polymerase chain reaction combined with restriction enzyme analysis for detection and differentiation of fowl adenoviruses. Avian Pathology, 30(6), 655–660.

Mirzazadeh, A., Asasi, K., Schachner, A., Mosleh, N., Liebhart, D., Hess, M., & Grafl, B. (2019). Gizzard Erosion Associated with Fowl Adenovirus Infection in Slaughtered Broiler Chickens in Iran.

Mori, Y., Kitao, M., Tomita, N., & Notomi, T. (n.d.). Real-time turbidimetry of LAMP reaction for quantifying template DNA.

Mori, Y., Kitao, M., Tomita, N., & Notomi, T. (2004). Real-time turbidimetry of LAMP reaction for quantifying template DNA. Journal of Biochemical and Biophysical Methods, 59(2), 145–157.

Notomi, T., Okayama, H., Masubuchi, H., Yonekawa, T., Watanabe, K., Amino, N., & Hase, T. (2000). Loop-mediated isothermal amplification of DNA. Nucleic Acids Res, 28(12), e63.

Ono, M., Okuda, Y., Yazawa, S., Shibata, I., Sato, S., & Okada, K. (2003). Outbreaks of adenoviral gizzard erosion in slaughtered broiler chickens in Japan. Veterinary Record, 153(25), 775–779.

Parthiban, M., Manoharan, S., Aruni, A. W., Prabhakar, T. G., Chandran, N. D. J., & Koteeswaran, A. (2004). Usefulness of polymerase chain reaction in early detection and tissue tropism of fowl adenovirus in experimentally infected chicken. Veterinary Research Communications, 28(7), 617–622.

Saifuddin, M., & Wilks, C. R. (1991). Pathogenesis of an acute viral hepatitis: inclusion body hepatitis in the chicken. Archives of Virology, 116(1–4), 33–43.

Sambrook, J., Maniatis, T., & Fritsch, E. F. (1989). Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory, 545. https://books.google.com/books/about/Molecular_Cloning.html?hl=th&id=EO2XXwAACAAJ

Schachner, A., Grafl, B., & Hess, M. (2021). Spotlight on avian pathology: fowl adenovirus (FAdV) in chickens and beyond–an unresolved host-pathogen interplay. Avian Pathology, 50(1), 2–5.

Schachner, A., Matos, M., Grafl, B., & Hess, M. (2018). Fowl adenovirus-induced diseases and strategies for their control–a review on the current global situation. Avian Pathology, 47(2), 111–126.

Songserm, T. (2007). Inclusion body hepatitis. Journal of Kasetsart Veterinary, 17: 97–102.

Sohaimi, N. M., Bejo, M. H., Omar, A. R., Ideris, A., & Isa, N. M. (2018). Hexon and fiber gene changes in an attenuated fowl adenovirus isolate from Malaysia in embryonated chicken eggs and its infectivity in chickens. Journal of Veterinary Science, 19(6), 759.

Sohaimi, N. M., & Hair-Bejo, M. (2021). A recent perspective on fiber and hexon genes proteins analyses of fowl adenovirus toward virus infectivity—a review. Open Veterinary Journal, 11(4), 569–580.

Toroghi, R., Sodavari, S., Tabatabaeizadeh, S. E., Sharghi, A. S., Irankhah, N., Fakhraee, M., Farzin, H. R., Sarani, M., Khayyat, S. H., Ashouri, M., & Torabi, M. (2022). The First Occurrence of Hepatitis-Hydropericardium Syndrome in Iran and Effective Applied Control Measures in the Affected Commercial Broiler Flock. Avian Diseases, 66(2), 213–219.

Yinur, D., Moges, B., Hassen, A., & Tessema, T. S. (2023). Loop mediated isothermal amplification as a molecular diagnostic assay: Application and evaluation for detection of Enterohaemorrhagic Escherichia coli (O157:H7). Practical Laboratory Medicine, 37, e00333.

Zhang, Y., Liu, R., Tian, K., Wang, Z., Yang, X., Gao, D., Zhang, Y., Fu, J., Wang, H., & Zhao, J. (2018). Fiber2 and hexon genes are closely associated with the virulence of the emerging and highly pathogenic fowl adenovirus 4. Emerging Microbes & Infections, 7(1), 199.