ลักษณะเรืองแสงสีเขียวที่แสดงออกในไม้น้ำสวยงามสองชนิดโดยการส่งถ่ายยีน gfp ด้วยอะโกรแบคทีเรียมเข้าสู่เนื้อเยื่อเป้าหมาย

บทคัดย่อ

การพัฒนาพันธุ์ไม้ให้มีลักษณะแปลกใหม่ทำได้โดยใช้การส่งถ่ายยีนที่มีลักษณะต้องการเข้าสู่เซลล์จีโนมพืช จึงได้ศึกษาลักษณะเรืองแสงสีเขียวที่แสดงออกโดยยีน gfp ในไม้น้ำ 2 ชนิด ได้แก่
อนูเบียสนานา (Anubias nana) และดาวกระจาย (Hygrophila difformis) โดยใช้อะโกรแบคทีเรียม (Agrobacterium tumefaciens) เป็นตัวกลางส่งถ่ายยีน gfp และยีนอื่น ๆ ที่จำเป็นต่อการแสดงออกของยีน gfp เข้าสู่เนื้อเยื่อโซมาติกแคลลัสในอนูเบียสนานา ขณะที่ดาวกระจายใช้ทั้งเนื้อเยื่อโซมาติกแคลลัสและเนื้อเยื่อต้นอ่อน ผลการศึกษา พบว่า ประสิทธิภาพการถ่ายฝากยีนอยู่ที่ 280 เซลล์ของอะโกรแบคทีเรียมที่มี
พลาสมิด (pCAMBIA1304) รับฝากไว้ในเซลล์ต่อ
ปริมาณพลาสมิดที่ใช้ 1 ไมโครกรัม ยีน gfp พร้อมด้วยยีนอื่น ๆ ที่จำเป็นทั้งหมดได้รับการส่งถ่ายสู่เนื้อเยื่อเป้าหมายสำเร็จ เนื่องจากการเกิดจุดสีน้ำเงินในเนื้อเยื่อจากปฏิกิริยาการติดสีน้ำเงินเนื่องจากยีน GUS การเกิดแถบดีเอ็นเอเป้าหมายของยีน gfp ขนาด 327 bp จากเทคนิคพีซีอาร์ และเกิดการแสดงออกของยีน gfp ด้วยการเรืองแสงสีเขียวจากโปรตีน GFP แต่ในไม้น้ำอนูเบียสนานาและดาวกระจายรุ่นลูก (T1) อายุ 6 เดือนที่ผลิตโดยการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อจากไม้น้ำรุ่นแรกที่ได้รับการถ่ายฝากยีน (T0) โดยใช้แคลลัสเป็นเนื้อเยื่อเป้าหมายไม่ปรากฏแถบดีเอ็นเอของยีน gfp ซึ่งอาจเป็นพราะการเกิดไคเมรา (chimera) แต่พบแถบดีเอ็นเอของยีน gfp ในรุ่นลูกของดาวกระจายที่ใช้ต้นอ่อนเป็นเนื้อเยื่อเป้าหมาย ดังนั้นการใช้แคลลัสจึงไม่เหมาะสมในการเป็นเนื้อเยื่อเป้าหมายในการถ่ายยีน gfp ในไม้น้ำดังกล่าวทั้งสองชนิด ในขณะที่การใช้เนื้อเยื่อต้นอ่อนเป็นเนื้อเยื่อเป้าหมายมีความเหมาะสมในไม้น้ำดาวกระจาย