การตรวจวิเคราะห์ชนิดไวรัส Nucleopolyhedrovirus ด้วย PCR-Based Typing
DOI:
https://doi.org/10.14456/thaidoa-agres.2009.16คำสำคัญ:
ไวรัส nucleopolyhedrovirus, NPV, Helicoverpa armigera, Spodoptera exigua, spodoptera litura, Trichoplusia ni, cathepsin gene, ตรวจวิเคราะห์ จำแนก PCR based-typingบทคัดย่อ
การตรวจวิเคราะห์ จำแนกชนิดไวรัส nucleopolyhedrovirus ด้วย PCR-based typing ดำเนินการทดลองวิจัยที่ห้องปฏิบัติการกลุ่มงานวิจัยการปราบศัตรูพืชทางชีวิภาพ กลุ่มกีฏและสัตววิทยา สำนักวิจัยและพัฒนาการอารักขาพืช กรมวิชาการเกษตร และคณะวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี มหาวิทยาลัยธรรมศาสตร์ รังสิต จ.ปทุมธานี และคณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ บางเขน กรุงเทพฯ ระหว่างเดือน เมษายน พ.ศ. 2549 – มีนาคม พ.ศ. 2551 ทำการตรวจวิเคราะห์ จำแนกชนิดไวรัสสกุล nucleopolyhedrovirus(NPV) โรคแมลง 4 ชนิด ได้แก่ ไวรัส NPV ของหนอนเจาะสมอฝ้าย (Helicovrpa armigera single-nucleocapsid NPV: HaSNPV ไวรัส NPV ของหนอนกระทู้หอม (Spodoptera exigua multiple nucleocapsid NPV: SeMNPV) ไวรัส NPV ของหนอนกระทู้ผัก (S. litura multiple nucleocapsid NPV: SIMNPV) และไวรัส NPV ของหนอนคืบกะหล่ำ (Trichoplusia ni multiple-nucleocapsid NPV: SIMNPV) ด้วยวิธี PCR based-typing โดยใช้ degenerate primers ที่ออกแบบคู่ไพรเมอร์จากยีน cathepsin ที่มีลำดับเบสคือ cathepsin forward primers 5´TT(AC)G AA(G)A GTC AA(G)T ATG CC(T)A T´3 และ cathepsin reverse primers 5´-TAG CA(GC)G TCG AC(T)G CCC A(G)TG(C) G-3´ ผลขนาดลายพิมพ์ดีเอ็นเอมีภาวะพหุสัณฐานที่ชัดเจนแสดงขนาดดีเอ็นเอของไวรัส HaSNPV มีขนาด 350 และ 300 คู่เบส ไวรัส SeMNPV มีขนาด 550 และ 250 คู่เบสและไวรัส TnMNPV มีขนาด 100 คู่เบส ซึ่งไพรเมอร์นี้สามารถนำไปใช้ในการตรวจวิเคราะห์ชนิดไวรัสเหล่านี้ได้ โดยใช้เวลาตั้งแต่การสกัดดีเอ็นเอที่ดัดแปลงจนกระทั่งถึงการอ่านผลใช้เวลาเพียง 16 ชม. นับเป็นวิธีการตรวจวิเคราะห์ไวรัสได้รวดเร็วกว่าวิธีการวินิจฉัยจากการตายของหนอนแมลง ซึ่งต้องใช้เวลาไม่น้อยกว่า 15 วัน
Downloads
เผยแพร่แล้ว
How to Cite
ฉบับ
บท
License
Copyright (c) 2017 วารสารวิชาการเกษตร (Thai Agricultural Research Journal)
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.
วารสารวิชาการเกษตร