การตรวจวิเคราะห์ชนิดไวรัส Nucleopolyhedrovirus ด้วย PCR-Based Typing

ผู้แต่ง

  • สุชลวัจน์ ว่องไวลิขิต สำนักวิจัยพัฒนาการอารักขาพืช กรมวิชาการเกษตร จตุจักร 10900
  • วัชรี สมสุข สำนักวิจัยพัฒนาการอารักขาพืช กรมวิชาการเกษตร จตุจักร 10900

DOI:

https://doi.org/10.14456/thaidoa-agres.2009.16

คำสำคัญ:

ไวรัส nucleopolyhedrovirus, NPV, Helicoverpa armigera, Spodoptera exigua, spodoptera litura, Trichoplusia ni, cathepsin gene, ตรวจวิเคราะห์ จำแนก PCR based-typing

บทคัดย่อ

การตรวจวิเคราะห์ จำแนกชนิดไวรัส nucleopolyhedrovirus ด้วย PCR-based typing ดำเนินการทดลองวิจัยที่ห้องปฏิบัติการกลุ่มงานวิจัยการปราบศัตรูพืชทางชีวิภาพ กลุ่มกีฏและสัตววิทยา สำนักวิจัยและพัฒนาการอารักขาพืช กรมวิชาการเกษตร  และคณะวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี  มหาวิทยาลัยธรรมศาสตร์ รังสิต จ.ปทุมธานี และคณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ บางเขน กรุงเทพฯ ระหว่างเดือน เมษายน พ.ศ. 2549 – มีนาคม พ.ศ. 2551 ทำการตรวจวิเคราะห์ จำแนกชนิดไวรัสสกุล nucleopolyhedrovirus(NPV) โรคแมลง 4 ชนิด ได้แก่ ไวรัส NPV ของหนอนเจาะสมอฝ้าย (Helicovrpa armigera single-nucleocapsid NPV: HaSNPV ไวรัส NPV ของหนอนกระทู้หอม (Spodoptera exigua multiple nucleocapsid NPV: SeMNPV) ไวรัส NPV ของหนอนกระทู้ผัก (S. litura multiple nucleocapsid NPV: SIMNPV) และไวรัส NPV ของหนอนคืบกะหล่ำ (Trichoplusia ni multiple-nucleocapsid NPV: SIMNPV) ด้วยวิธี PCR based-typing โดยใช้ degenerate primers ที่ออกแบบคู่ไพรเมอร์จากยีน cathepsin ที่มีลำดับเบสคือ cathepsin forward primers 5´TT(AC)G   AA(G)A   GTC   AA(G)T   ATG   CC(T)A   T´3   และ cathepsin reverse primers 5´-TAG   CA(GC)G   TCG   AC(T)G   CCC   A(G)TG(C)   G-3´   ผลขนาดลายพิมพ์ดีเอ็นเอมีภาวะพหุสัณฐานที่ชัดเจนแสดงขนาดดีเอ็นเอของไวรัส HaSNPV  มีขนาด 350 และ 300 คู่เบส ไวรัส SeMNPV มีขนาด 550 และ 250 คู่เบสและไวรัส TnMNPV มีขนาด 100 คู่เบส  ซึ่งไพรเมอร์นี้สามารถนำไปใช้ในการตรวจวิเคราะห์ชนิดไวรัสเหล่านี้ได้  โดยใช้เวลาตั้งแต่การสกัดดีเอ็นเอที่ดัดแปลงจนกระทั่งถึงการอ่านผลใช้เวลาเพียง 16 ชม. นับเป็นวิธีการตรวจวิเคราะห์ไวรัสได้รวดเร็วกว่าวิธีการวินิจฉัยจากการตายของหนอนแมลง ซึ่งต้องใช้เวลาไม่น้อยกว่า 15 วัน

Downloads

เผยแพร่แล้ว

2009-12-31

How to Cite

ว่องไวลิขิต ส., & สมสุข ว. (2009). การตรวจวิเคราะห์ชนิดไวรัส Nucleopolyhedrovirus ด้วย PCR-Based Typing. วารสารวิชาการเกษตร, 27(3), 234. https://doi.org/10.14456/thaidoa-agres.2009.16