การใช้เทคนิค Real time PCR ในการตรวจหา แบคทีเรีย Xanthomonas citri subsp. citri สาเหตุโรคแคงเคอร์ เพื่อการตรวจรับรองแปลงผลิตส้มโอปลอดโรคแคงเคอร์

บทคัดย่อ

การตรวจรับรองแปลงปลูกส้มโอจำเป็นต้องมีวิธีการที่มีประสิทธิภาพในการตรวจหาแบคทีเรีย Xanthomonas citri subsp. citri สาเหตุโรคแคงเคอร์ การวิจัยนี้จึงมีจุดมุ่งหมายที่จะนำเทคนิค Real time PCR ใช้ primer D1/D2 และ primer 2/3 ที่ออกแบบมาจากยีนavirulence/ pathogenicity (pthA gene) ที่มีความเฉพาะเจาะจงกับแบคทีเรีย X. citri subsp. citri มีความไวในการตรวจแบคทีเรียที่ความเข้มข้นต่ำสุดของ DNA ที่ระดับ 5 พิโคกรัม และความเข้มข้นต่ำสุดของเซลล์แบคทีเรียที่ตรวจได้คือ 81 CFU/ml วิธีการนี้สามารถตรวจพบแบคทีเรีย X. citri subsp. citri ได้อย่างแม่นยำทั้งในตัวอย่างที่แสดงอาการของโรคแคงเคอร์ชัดเจน และตัวอย่างที่ยังไม่แสดงอาการ จากการนำวิธีการดังกล่าว ไปใช้ตรวจรับรองแปลงตลอดระยะเวลาผลิตส้มโอเพื่อคงสถานภาพ การปลอดโรคแคงเคอร์ของแปลงปลูกเพื่อส่งไปยังสหภาพยุโรป ในปี พ.ศ. 2557 ที่แปลงปลูกส้มโออ.เวียงแก่น จ.เชียงราย จำนวน 103 แปลงผลการตรวจ พบว่า มีแปลงปลูกส้มโอปลอดโรคแคงเคอร์ผ่านการตรวจรับรอง เพื่อส่งไปยังสหภาพยุโรป จำนวน 84 แปลง เทคนิค Real time PCR เป็นที่ยอมรับสำหรับใช้ตรวจรับรองการปลอดจากโรคแคงเคอร์ของแปลงปลูกส้มโอเพื่อส่งออกไปสหภาพยุโรป จึงทำให้สามารถเปิดตลาดการส่งออกส้มโออย่างถูกต้อง ตามกฎข้อบังคับของสหภาพยุโรป และวิธีการยังใช้เป็นต้นแบบในการตรวจรับรองสวนเพื่อการส่งออกไปประเทศอื่นที่กำหนดให้โรคแคงเคอร์เป็นศัตรูพืชกักกันได้