การตรวจหาเชื้อแบคทีเรีย Coagulase-positive Staphylococci ที่ดื้อต่อยาในกลุ่มเมทธิซิลินที่แยกจากสุนัขที่เข้ารับการรักษาในโรงพยาบาลสัตว์คณะสัตวแพทยศาสตร์ มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ โดยใช้เทคนิค Duplex PCR

บทคัดย่อ

ในปัจจุบัน Methicillin-resistant coagulase-positive Staphylococci (MRCPS) ในสุนัขเริ่มมีการพบและก่อปัญหามากขึ้น วิธีการตรวจสอบหาเชื้อในกลุ่มนี้ที่ใช้ในห้องปฏิบัติการทั่วไปคือ หาความไวต่อยาปฏิชีวนะ (Drugs susceptibility) โดยการใช้เทคนิค disk diffusion แต่อย่างไรก็ตามวิธีนี้มีข้อจำกัดคือ จำนวนเชื้อที่ใช้เวลาที่ใช้สาหรับการบ่มเชื้ออุณหภูมิ และ pH ของอาหารเลี้ยงเชื้อ ในการศึกษาครั้งนี้จึงใช้เทคนิค Duplex PCR ที่มีข้อดีคือ มีความไวและแม่นยำสูงเข้ามาช่วยยืนยันการดื้อยาของเชื้อ Methicillin-resistant coagulase-positive Staphylococci (MRCPS) โดยหายีนดื้อยา mec A และ ยีน fem B ซึ่งเป็นยีนที่จำเพาะต่อเชื้อในกลุ่ม coagulase-positive Staphylococci ทำการเก็บตัวอย่างจากสุนัขที่เข้ารับการักษาในโรงพยาบาลสัตว์ทั้งหมด 115 ตัว โดยวิธี nasal swab และ wound swab สามารถแยกเชื้อกลุ่ม coagulase-positive Staphylococci ได้ทั้งหมด 110 ตัวอย่าง (จากจมูก 60 ตัวอย่าง และแผล 50 ตัวอย่าง ) เมื่อนำมาทดสอบ disk diffusion ได้ผลการดื้อต่อยาปฏิชีวนะเมทธิซิลลิน 16 ตัวอย่าง และน่าสงสัยว่าดื้อต่อยาเมทธิซิลลิน (intermediated) 2 ตัวอย่าง หลังจากนั้นนำตัวอย่างไปตรวจโดยเทคนิค duplex PCR เพื่อหายีน mec A และ fem B พบว่าในกลุ่มที่ดื้อต่อยาเมทธิซิลลิน ให้ผลบวกทั้งหมด 16 ตัวอย่าง สำหรับในกลุ่มที่น่าสงสัยว่าดื้อต่อยาเมทธิซิลลิน (intermediated) ให้ผลบวก1 ตัวอย่าง และผลลบ 1 ตัวอย่าง การศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นว่ามีการแตกต่างของผลการทดลองทั้ง 2 วิธี ซึ่งเป็นได้ว่าจะมาจากข้อเสียของเทคนิค  disk diffusion ในขณะที่การตรวจหา ยีน mec A เป็นวิธีที่ได้รับการยอมรับว่าเป็น Gold – Standard สำหรับการตรวจหาเชื้อ methicillin-resistant coagulase-positive Staphylococci (MRCPS) ดังนั้นในการตรวจหาเชื้อในกลุ่ม methicillin-resistant coagulase-positive Staphylococci (MRCPS) จึงมีความจำเป็นที่จะต้องยืนยันโดยใช้เทคนิค duplex PRC