ประสิทธิภาพของแอนติบอดีที่ได้จากการเหนี่ยวนำการสร้างด้วยโปรตีนลูกผสม Outer membrane protein H ในการทำลายเชื้อ Pasteurella multocida ด้วยวิธีการเหนี่ยวนำการทำลายด้วยวิถีคอมพลีเมนท์
Main Article Content
บทคัดย่อ
Outer membrane protein H (OmpH) เป็นโปรตีนสำคัญที่อยู่บนเยื่อหุ้มเซลล์ของเชื้อ Pasteurella multocida ซึ่งเป็นเชื้อก่อโรคเฮโมรายิกเซพติซีเมียหรือโรคคอบวมในโคและกระบือ ในการศึกษานี้ทางคณะผู้วิจัยได้ทำการทดสอบประสิทธิภาพของแอนติบอดีที่ได้จากการกระตุ้นโดยใช้โปรตีนลูกผสมจาก recombinant outer membrane protein H (rOmpH) ที่ผลิตโดยอาศัย Escherichia coli expression vector system เมื่อนำโปรตีนที่ได้ดังกล่าวไปทำให้บริสุทธิ์แล้วนำมาฉีดกระต่ายเพื่อผลิตโพลีโคลนัลแอนติบอดี พบว่าแอนติบอดีจำเพาะที่กระต่ายสร้างขึ้นสามารถต่อต้านเชื้อ P. multocida สายพันธุ์ก่อโรคเฮโมรายิกเซพติซีเมียด้วยวิถีคอมพลีเมนท์อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<0.05) เมื่อใช้ซีรั่มของกระต่ายที่ได้รับการฉีด rOmpH เทียบกับกลุ่มที่ใช้ซีรั่มของโคที่มีแอนติบอดีและซีรั่มของโคที่ไม่มีแอนติบอดีต่อเชื้อ P. multocida การศึกษาครั้งนี้สรุปได้ว่าแอนติบอดีจำเพาะที่ได้รับการเหนี่ยวนำจากโปรตีนลูกผสม rOmpH มีความสามารถทำลายเชื้อ P. multocida สายพันธุ์ก่อโรคเฮโมรายิกเซพติซีเมียในระดับห้องปฏิบัติการได้
Article Details
เอกสารอ้างอิง
Bradford, M.M. 1976. A rapid and sensitive method for quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal. Biochem. 72: 284-354.
Confer, A.W., Ayalew, S., Montelongo, M., Step, D.L., Wray, J.H., Hansen, R.D. and Panciera, R.J. 2009. Immunity of cattle following vaccination with a Mannheimia haemolytica chimeric PlpE–LKT (SAC89) protein. Vaccine. 27: 1771-1776.
Joshi, S., Tewari, K. and Singh, R. 2013. Comparative immunogenicity and protective efficacy of different preparations of outer membrane proteins of Pasteurella multocida (B:2) in a mouse model. Vet. Arhiv. 83, 665-676.
Laemmli, U.K. 1970. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 227: 680-685.
Lee, J., Kim, Y.B. and Kwon M. 2007. Outer membrane protein H for protective immunity against Pasteurella multocida. J. Microbiol. 45: 179-184.
Luo, Y., Glisson, J.R., Jackwood, M.W., Hancock, R.E.W., Bains, M., Cheng, I.N. and Wang, C. 1997. Cloning and characterization of the major outer membrane protein gene (ompH) of Pasteurella multocida X-73. J. Bacteriol. 179: 7856-7864.
Luo, Y., Zeng, Q., Glisson, J.R., Jackwood, M.W., Cheng, I.N. and Wang, C. 1999. Sequence analysis of Pasteurella multocida major outer membrane protein (OmpH) and application of synthetic peptides in vaccination of chickens against homologous strain challenge. Vaccine. 17: 821-831.
McQuillen, D.P., Gulati, S. and Rice, P.A. 1994. Complement-mediated bacterial killing assays. Methods Enzymol. 236: 137-146.
Okay, S., Ozcengiz, E., Gursel, I. and Ozcengiz, G. 2012. Immunogenicity and protective efficacy of the recombinant Pasteurella lipoprotein E and outer membrane protein H from Pasteurella multocida A:3 in mice. Res. Vet. Sci. 93: 1261–1265.
Pandher, K., Confer, A.W. and Murphy, G.L. 1998. Genetic and immunologic analyses of PlpE, a lipoprotein important in complement-mediated killing of Pasteurella haemolytica serotype 1. Infect. Immunol. 66: 5613-5619.
Rimler, R.B., Glisson, J.R. 1997. Fowl Cholera, p.143-159. In Calnek, B.W. and Barnes, H.J. (eds.), Diseases of Poultry, 10th ed. Iowa State University Press, Ames, IA.
Rimler, R.B. and Rhoades, K.R. 1989. Pasteurella multocida and Fowl Cholera, p.37-74, 95-114.In Adlam, C. and Rutter, J.M. (eds.), Pasteurella and Pasteurellosis, 1st ed. Academic Press Limited, London.
Singh, A.P., Singh, S., Ranjan, R., Gupta, S.K., Singh, V.P. and Sharma, B. 2010. Molecular heterogeneity of plpE gene in Indian isolates of Pasteurella multocida and expression of recombinant PlpE in vaccine strain of P. multocida serotype B:2. J. Vet. Sci. 11(3): 227-233.
Sthitmatee, N., Numee, S., Kawamoto, E., Sasaki, H., Yamashita, K., Takahashi, N., Kataoka, Y. and Sawada, T. 2008. Protection of chickens from fowl cholera by vaccination with recombinant adhesive protein of Pasteurella multocida. Vaccine. 26: 2398-2407.
Taylor, P.W., 1992. Complement-mediated killing of susceptible gram-negative bacteria: an elusive mechanism. Exp. Clin. Immunogenet. 9: 48-56.
Thanasarasakulpong, A., Poolperm, P., Tankaew, P., Sawada, T. and Sthitmatee, N. 2015. Protectivity conferred by immunization with intranasal recombinant outer membrane protein H from Pasteurella multocida serovar A1 in chickens. J. Vet. Med. Sci. 77(3): 321–326.