การตรวจหาเชื้อ Leptospira spp. ที่ก่อโรคในน้ำเชื้อแช่แข็งของพ่อพันธุ์กระบือปลักด้วยเทคนิคปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส

Main Article Content

อินทิพร เพ็งรัตน์
ประยุทธ แซ่โค้ว
ธัชฎาพร ไชยคุณ-มาร์คูว

บทคัดย่อ

โรคเลปโตสไปโรซิสหรือโรคฉี่หนูเป็นโรคติดเชื้อจากสัตว์สู่คนที่สำคัญโดยเฉพาะกลุ่มอาชีพเกษตรกรผู้เลี้ยงสัตว์ กระบือปลักที่ติดเชื้อมักจะไม่แสดงอาการแต่สามารถส่งผลให้เกิดความไม่สมบูรณ์พันธุ์ได้ การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อตรวจหาเชื้อ Leptospira spp. ที่ก่อโรคในน้ำเชื้อแช่แข็งของพ่อพันธุ์กระบือปลักจำนวน 56 ตัว ที่มีจำหน่ายและเกษตรใช้อยู่ทั่วไปในพื้นที่ประเทศไทยด้วยเทคนิคปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (polymerase chain reaction; PCR) นำตัวอย่างทั้งหมดมาสกัด DNA แล้วแบ่งตัวอย่างออกเป็น 7 กลุ่ม และตรวจด้วยวิธีปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส โดยใช้ไพรเมอร์ (primer) เดี่ยว LipL32 และ 16S rRNA และ multiplex primer Ph In และ Sa ผลการศึกษาพบว่า ไม่พบเชื้อ Leptospira spp. ในตัวอย่างทั้ง 7 กลุ่ม อย่างไรก็ตามตัวอย่างที่นำมาศึกษาเป็นน้ำเชื้อแช่แข็งที่มีการผสมยาเพนิซิลลินและสเตร็ปโตมัยซินในสารละลายน้ำเชื้อแช่แข็ง ซึ่งยาปฏิชีวนะนี้อาจจะยังมีประสิทธิภาพต่อเชื้อ Leptospira spp. ได้ หรือพ่อพันธุ์กระบือปลักมีสุขภาพดีไม่มีการติดเชื้อ Leptospira spp. ตั้งแต่ต้น

Article Details

รูปแบบการอ้างอิง
เพ็งรัตน์ อ., แซ่โค้ว ป. และ ไชยคุณ-มาร์คูว ธ. (2023) “การตรวจหาเชื้อ Leptospira spp. ที่ก่อโรคในน้ำเชื้อแช่แข็งของพ่อพันธุ์กระบือปลักด้วยเทคนิคปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส”, สัตวแพทย์มหานครสาร, 18(1), น. 9–18. available at: https://li01.tci-thaijo.org/index.php/jmvm/article/view/257972 (สืบค้น: 12 ธันวาคม 2025).
ประเภทบทความ
บทความวิจัย

เอกสารอ้างอิง

Andrabi, S. M., Khan, L. A. and Shahab, M. 2016. Isolation of bacteria in semen and evaluation of antibiotics in extender for cryopreservation of buffalo (Bubalus bubalis) bull spermatozoa. Andrologia. 1-9.

Ansari, M., Rakha, B. and Akhter, S. 2017. Cryopreservation of Nili-Ravi buffalo (Bubalus bubalis) semen in AndroMed® extender; in vitro and in vivo evaluation. Reproduction in Domestic Animals. 2017: 1-6.

Centers for Disease Control and Prevention (CDC). 2019. Leptospirosis: Systematic review of the published literature. https://www.cdc.gov/leptospirosis/index.html. (Accessed 25 August 2022).

Chadsuthi, S., Bicout, D. J., Wiratsudakul, A., Suwancharoen, D., Petkanchanapong, W., Modchang, C., Triampo, w., Ratanakorn, p. and Chalvet-Monfray, K. 2017. Investigation on predominant Leptospira serovars and its distribution in humans and livestock in Thailand, 2010-2015. PLOS Neglected Tropical Diseases. 10.1371: 1-18.

Chadsuthi, S., Chalvet-Monfray, K., Wiratsudakul, A., Suwancharoen, D. and Cappelle, J. 2018. A remotely sensed flooding indicator associated with cattle and buffalo leptospirosis cases in Thailand 2011–2013. BMC Infectious Diseases. 18(602): 1-9.

Chaikhun, T., Tharasanit , T., Rattanatep, J.,De Rensis, F. and Techakumphu, M. 2010. Fertility of swamp buffalo after synchronization of ovulation by sequential GnRH and PGF administration (ovsynch) and fixed-timed artificial insemination. Theriogenology. 74: 1371-1376.

Department of Disease Control (DDC). 2021. Leptospirosis. Systematic review of the published literature. https://ddc.moph.go.th/brc/news.php?news=26719&deptcode=b rc. (Accessed 25 August 2022).

Department of Livestock Development (DLD). 2022. Farmer/Livestock Information, Fiscal Year 2022. Systematic review of the published literature. http://ict.dld.go.th/webnew/ index.php/th/service-ict/report/396-report-thailand-livestock/reportservey2565. (Accessed 25 August 2022).

Fraga, T. R., Carvalho, E., Isaac, L. and Barbosa, A. S. 2015. Leptospira and Leptospirosis. Animal and Ectoparasitic Source Infections. 1973-1990.

Ganda, M. R., Souza, M. A., Lourencetti, M. P., Ciuffa, A. Z., Soares, P. M. and Lima, A. M. 2016. Molecular detection of Leptospira spp. in bull semen. Revue de Médecine Vétérinaire. 167(11-12): 297-301.

Givens, M. D. 2018. Review: Risks of disease transmission through semen in cattle. Animal. 12(S1): 165-171.

Glorian, N. G., Villanue, S. Y. A. M., Yanagiha, Y. and Yoshid, S. 2016. Identification of Prevalent Leptospira Serovars Infecting Water Buffaloes, Cows, Dogs, Pigs and Rats in the Philippines. Southeast Asian J Trop Med Public Health. 47(4): 766-773.

Guedes, I. B., Souza, G. O., Paula Castro, J. F., Souza Filho, A. F., Cavalini, M. B., Taniwaki, S. A., Maia, A. L. P., Pereira, I. C. and Heinemann, M. B. (2020). Identification of Pathogenic Leptospira Species in the Urogenital Tract of Water Buffaloes (Bubalus bubalis) From the Amazon River Delta Region, Brazil. Frontiers in Veterinary Science, 7(269), 1-7.

Hamond, C., Martins, G., Medeiros, M. A. and Lilenbaum, W. 2013. Presence of Leptospiral DNA in Semen Suggests Venereal Transmission in Horses. Journal of Equine Veterinary Science. 33:1157-1159.

Heinemann, M. B., Garcia, J. F., Nunes, C. M., Gregori, F., Higa, Z. M., Vasconcellos, S. A. and Richtzenhain, L. J. 2000. Detection and differentiation of Leptospira spp. serovars in bovine semen by polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism. Veterinary Microbiology, 73, 261-267.

Lilenbaum, W., Varges, R., Brandao, F. Z., Cortez, A., de Souza, S. O., Brandao, P. E., Richtzenhain, L. J. and Vasconcellos, S. A. 2008. Detection of Leptospira spp. in semen and vaginal fluids of goats and sheep by polymerase chain reaction. Theriogenology. 69:837-842.

Loureiro, A. P. and Lilenbaum, W. 2020. Genital bovine leptospirosis: A new look for an old disease. Theriogenology. 141:41-47.

Maiolino, S. R., Cortez, A., Langoni, H., Giuffrida, R., Santos, J. R., Júnior, G. D., Lara, G. H. B., Motta, R. G., Chacur, M. G. M., Monteiro, F. M., Heinemann, M. B., Filho, A. F. S., Martins, L. S. A., Bello, T. S. and Ribeiro, M. G. 2021. Sperm viability, serological, molecular, and modified seminal plasma agglutination tests in the diagnosis of Leptospira in the semen and serum of bovine bulls. Brazilian Journal of Microbiology. 1-8.

Masri, S. A., Nguyen, P. T., Gale, S. P., Howard, C. J. and Jung, S. C. 1997. A Polymerase Chain Reaction Assay for the Detection of Leptospira spp. in Bovine Semen. Canadian Journal of Veterinary Research, 61, 15-20.

Mughal, D. H., Ijaz, A., Yousaf, M. S., Wadood, F. and Farooq, U. 2017. Cryopreservation of buffalo (Bubalus bubalis) semen-limitations and expectations. Buffalo Bulletin. 36(1): 1-14.

Na-Chiangmai, A. 2002. Raising buffaloes. Department of Livestock Development. Bangkok. p. 1-9.

Perumal, P., K., C. J., Srivastava, N., Vupru, K. and Srivastava, S. K. 2013. Infectious Causes of Infertility in Buffalo Bull (Bubalus bubalis). International Journal of Bio-resource and Stress Management. 4(1):084-090.

Philip, N., Garba, B. and Neela, V. K. 2018. Long-term preservation of Leptospira spp.: challenges and prospects. Applied Microbiology and Biotechnology. 102: 5427–5435.

Philpott, M. 1993. The dangers of disease transmission by artificial insemination and embryo transfer. British Veterinary Journal. 149(4): 339-369.

Pui, C. F., Bilung, L. M., Su'ut, L. and Apun, K. 2015. Prevalence of Leptospira Species in Environmental Soil and Water from National Parks in Sarawak, Malaysia. Borneo Journal of Resource Science and Technology, 5(1), 49-57.

Suwancharoen, D., Chaisakdanugull, Y., Thanapongtharm, W. and Yoshida, S. 2013. Serological survey of leptospirosis in livestock in Thailand. Epidemiology and Infection. 141:2269-2277.

Suwancharoen, D., Limlertvatee, S., Chetiyawan, P., Tongpan, P., Sangkaew, N., Sawaddee, Y., Inthakan, K. and Wiratsudakul, A. 2016. A nationwide survey of pathogenic leptospires in urine of cattle and buffaloes by Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) method in Thailand, 2011–2013. The Journal of Veterinary Medical Science. 78(9):1495-1500.

Uavechanichkul, R. 2008. Guidelines for Quality Control of Semen Quality for Artificial Insemination. Department of Livestock Development. Bangkok. p. 36-116.

Vital-Brazil, J. M., Balassiano, I. T., Oliveira, F. S., Souza Costa, A., Hillen, L. and Pereira, M. M. 2010. Multiplex PCR-based detection of leptospira in environmental water samples obtained from a slum settlement. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz, 105(3), 353-355.

Wongpanit, K., Suwanacharoen, D. and Srikram, A. 2012. Serological Survey of Leptospirosis in Thai Swamp Buffalo (Bubalus bubalis) in Sakon Nakhon Province, Thailand. Kasetsart Journal (Natural Science). 46:736-741.