การคัดกรองและระบุชนิดรา Trichoderma species ที่สร้างเอนไซม์ไคติเนส
คำสำคัญ:
Trichoderma species, เอนไซม์ไคติเนส, DNS methodบทคัดย่อ
รา Trichoderma species ที่เป็นปฏิปักษ์ต่อราสาเหตุโรคพืชส่วนใหญ่สร้างเอนไซม์ไคติเนส ซึ่งเป็นคุณสมบัติหนึ่งของการเป็นราปฏิปักษ์ ดังนั้นงานวิจัยนี้จึงมีวัตถุประสงค์เพื่อตรวจสอบการสร้างเอนไซม์ไคติเนสของรา Trichoderma species และระบุชนิดของไอโซเลทที่สร้างเอนไซม์ไคติเนสได้สูงสุด โดยทดสอบการสร้างเอนไซม์ไคติเนสเบื้องต้นของรา Trichoderma species จำนวน 26 ไอโซเลท บนอาหารแข็ง chitinase detection medium pH 4.7 และวัดค่ากิจกรรมเอนไซม์ไคติเนสในน้ำเลี้ยงเชื้อ PDB โดยวิธีการหาปริมาณน้ำตาลรีดิวซ์ที่ผลิตได้ด้วยวิธี DNS method ผลการทดลองพบว่า รา Trichoderma species สามารถสร้างเอนไซม์ไคติเนสได้จำนวน 22 ไอโซเลท โดย T-GL7 มีค่ากิจกรรมเอนไซม์ไคติเนสสูงสุด 0.0082 U/ml การตรวจสอบลักษณะทางสัณฐานวิทยาและลำดับนิวคลีโอไทด์บริเวณ internal transcribed spacer (ITS) แสดงให้เห็นว่าไอโซเลท T-GL7 คือรา T. reesei
เอกสารอ้างอิง
Agrawal, T., & Kotasthane, A.S. (2012). Chitinolytic assay of indigenous Trichoderma isolates collected from different geographical locations of Chhattisgarh in Central India. A SpringerPlus, 1, 73.
El-Katatny, M.H.A., Somitsch, W., Robra, K.H., El-Katatny, M.S., & Gübitz, G. (2000). Production of chitinase and b-1,3-glucanase by Trichoderma harzianum for control of the phytopathogenic fungus Sclerotium rolfsii. Food Technology and Biotechnology, 38, 173 - 180.
Grosch, R., Lottmannn, J., Rehn, V.N.C., Rehn, K.G., Mendonça-Hagler, L., Smalla, K., & Berg, G. (2007). Analysis of antagonistic interactions between Trichoderma and Hypocrea. Fungal Genet. Biol, 42, 813 - 828.
Harman, G.E., Howell, C.R., & Viterbo, A. (2004). Trichoderma species opportunistic, avirulent plant symbionts. Nature Reviews Microbiology, 2, 43 - 56.
Khatri, K.D., Tiwari, N.D., & Bariya, S.H. (2017). Chitinolytic efficacy and secretion of cell wall-degrading enzymes from Trichoderma spp. in response to phytopathological fungi. Applied Biology & Biotechnology, 5, 1 - 8.
Kubicek, P.C., & Harman, E.G. (1998). Trichoderma and Gliocladium: basic biology, taxonomy and genetics. CRC Press, 1, 1 - 300.
Miller, G.L. (1959). Use of dinitrosalicylic acid reagent for determination of reducing sugar. Analytical Biochemistry, 31, 426 - 428.
Samuels, J.G., & Hebbar, K.P. (2015). Trichoderma identification and agricultural applications. The American Phytopathological Society, 1 - 196.
Sahai, A.S., & Manocha, M.S. (1993). Chitinase of fungi and plants: Their involvement in morphogenesis and host-parasite interaction. Microbiology Reviews, 11, 317 - 338.
Saitoh, K.I., Togashi, K., & Arie, T. (2006). A simple method for a mini-preparation of fungal DNA. Journal of General Plant Pathology, 72, 348 - 350
Sivasithamparam, K., & Ghisalberti, E.L. (1998). Secondary metabolism in Trichoderma and Gliocladium. In: Kubicek, C. P. & Harman, G. E. (Eds). Trichoderma and Gliocladium. Taylor and Francis, 1, 139 - 191.
Urbina-Salazar, R.A., Inca-Torres, R.A., Falcón-García, G., Carbonero-Aguilar, P., Rodríguez-Morgado, B. Campo, A.J., Parrado, J., & Bautista, J. (2018). Chitinase Production by Trichoderma harzianum grown on a chitin-rich mushroom byproduct formulated medium. Waste and Biomass Valorization, 10, 1 - 9.
Weindling, R. (1932). Trichoderma lignorum as a parasite of other soil fungi. Phytopathology, ISSUE 22, 837 - 845.
White, T.J., Bruns, T., Lee, S., & Taylor, J.L. (1990). Amplification and direct sequencing of fungal ribosomal RNA genes for phylogenetics. PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications, 38, 315 - 322.
