ผลของสารละลายบัฟเฟอร์ สารไครโอโพรเทคแทนท์ และอัตราการลดอุณหภูมิ ที่มีต่อการเคลื่อนที่สเปิร์มปลาดุกอุยหลังการแช่แข็ง

Main Article Content

วีรพงศ์ วุฒิพันธุ์ชัย
ปฏิญญา อ้นขวัญเมือง
ตรีรัตน์ สุขสวัสดิ์
สุบัณฑิต นิ่มรัตน์

บทคัดย่อ

การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาผลของสารละลายบัฟเฟอร์ สารไครโอโพรเทคแทนท์และอัตราการลดอุณหภูมิต่อการเคลื่อนที่ของสเปิร์มปลาดุกอุย (Clarias macrocephalus) ที่แช่แข็งด้วยวิธีการใช้เครื่องมือแช่แข็งอัตโนมัติ เปรียบเทียบกับวิธีการใช้กล่องโฟม  การทดลองที่ 1 น้ำเชื้อสดปลาดุกอุยที่เจือจางด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ Calcium-free Hank’s Balanced Salt Solution (Ca-F HBSS) ผสมกับสารไครโอโพรเทคแทนท์ 6 ชนิด คือ Dimethyl sulfoxide (DMSO), Methanol, Glycerol, Sucrose, Ethylene glycol และ Propylene glycol ที่ความเข้มข้นสุดท้ายเท่ากับ 5%, 10% และ 15 % และแช่แข็งด้วยอัตราการลดอุณหภูมิเท่ากับ -3, -5 และ -8 องศาเซลเซียส/นาที พบว่าการเคลื่อนที่ของสเปิร์มหลังการละลายมีค่าสูงสุด (p<0.05) เมื่อแช่แข็งด้วย 10%DMSO และใช้อัตราการลดอุณหภูมิ -8 องศาเซลเซียส/นาที เปรียบเทียบกับชุดการทดลองอื่นที่ใช้สารไครโอโพรเทคแทนท์และอัตราการลดอุณหภูมิต่างกัน  การทดลองที่ 2 ทำโดยเจือจางน้ำเชื้อสดปลาดุกอุยในสารละลายบัฟเฟอร์ 3 ชนิด คือ Ca-F HBSS, 0.9% NaCl และ Extender 7 ที่มี 10% DMSO ก่อนแช่แข็งภายในกล่องโฟมที่ระดับความสูงเหนือผิวหน้าไนโตรเจนเหลว 2, 4 และ 6 เซนติเมตร เป็นเวลานาน 5, 10 และ 15 นาที พบว่า การแช่แข็งด้วย Ca-F HBSS และ 10%DMSO ที่ความสูง 6 เซนติเมตร เหนือผิวหน้าไนโตรเจนเหลวนาน 10 นาที ทำให้การเคลื่อนที่ของสเปิร์มหลังการละลายมีค่าสูงสุด (p<0.05) เมื่อเปรียบเทียบกับชุดการทดลองอื่นๆที่ต่างกันทั้งหมด ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าวิธีการแช่แข็งโดยใช้กล่องโฟมมีศักยภาพในการแช่แข็งน้ำเชื้อปลาดุกอุยและยังสามารถนำไปใช้ประโยชน์สำหรับการเพาะเลี้ยงและการอนุรักษ์พันธุ์สัตว์น้ำชนิดอื่นต่อไป

Article Details

บท
บทความวิจัย
Author Biographies

วีรพงศ์ วุฒิพันธุ์ชัย, ภาควิชาวาริชศาสตร์ คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยบูรพา

ตำบลแสนสุข  อำเภอเมือง  จังหวัดชลบุรี  20131

ปฏิญญา อ้นขวัญเมือง, ภาควิชาวาริชศาสตร์ คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยบูรพา

ตำบลแสนสุข  อำเภอเมือง  จังหวัดชลบุรี  20131

ตรีรัตน์ สุขสวัสดิ์, โปรแกรมวิทยาศาสตร์ชีวภาพ คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยบูรพา

ตำบลแสนสุข  อำเภอเมือง  จังหวัดชลบุรี  20131

สุบัณฑิต นิ่มรัตน์, ภาควิชาจุลชีววิทยา คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยบูรพา

ตำบลแสนสุข  อำเภอเมือง  จังหวัดชลบุรี  20131

References

Abinawanto, K.N. and Lestari R. 2012. The Effect of sucrose on sperm quality of Osphronemus goramy two days post-cryopreservation. Journal of Agricultural Science and Technology B2: 204-207.

Cabrita, E., Sarasquete, C., Martinez-Paramo, S., Robles, V., Beirao, J., Perez-Cerezales, S. and Herraez, M.P. 2010. Cryopreservation of fish sperm: applications and perspectives. Journal of Applied Ichthyology 26: 623-635.

Fisheries Development Policy and Strategy Division. 2018. Fisheries Statistics of Thailand 2018. No. 10/ 2020. Published documents, Department of Fisheries, Bangkok. (in Thai)

Gil, H.W., Lee, T.H. and Park, I.S. 2017. Effects of cryoprotectants and diluents on the cryopreservation of spermatozoa from Far Eastern Catfish, Silurus asotus. Development & Reproduction 21(1): 79-91.

Hu, E., Yang, H. and Tiersch, T.R. 2011. High-throughput cryopreservation of spermatozoa of blue catfish (Ictalurus furcatus): establishment of an approach for commercial-scale processing. Cryobiology 62: 74-82.

Irawan, H., Vuthiphandchai, V. and Nimrat, S. 2010. The effect of extenders, cryoprotectants and cryopreservation methods on common carp (Cyprinus carpio) sperm. Animal Reproduction Science 122: 236-243.

Ji, X.S., Chen, S.L., Tian, Y.S., Yu, G.C., Sha, Z.X., Xu, M.Y. and Zhang, S.C. 2004. Cryopreservation of sea perch (Lateolabrax japonicus) spermatozoa and feasibility for production-scale fertilization. Aquaculture 241: 517-528.

Kwantong, S. and Bart, A.N. 2003. Effect of cryoprotectants, extenders and freezing rates on the fertilization rate of frozen striped catfish, Pangasius hypophthalmus (Sauvage), sperm. Aquaculture Research 34: 887-893.

Lal, K.K., Barman, A.S., Punia, P., Khare, P., Mohindra, V., Lal, B., Gopalakrishnan, A., Sah, R.S. and Lakra, W. 2009. Effect of extender composition on sperm cryopreservation of Asian catfish Heteropneustes fossilis (Bloch) and Clarias batrachus (Linnaeus). Asian Fisheries Science 22: 137-142.

Lim, H.K., Irfan, Z., Lee, H.B., Song, J.H. and Lee, Y.H. 2021. Effect of diluent variation on cryopreservation of large yellow croaker Larimichthys crocea. Fisheries and Aquatic Sciences 24(2): 63-77.

Liu, Q., Li, J., Zhang, S., Ding, F., Xu, X., Xiao, Z. and Xu, S. 2006. An efficient methodology for cryopreservation of spermatozoa of red seabream, Pagrus major, with 2-mL cryovials. Journal of the World Aquaculture Society 37(3): 289-297.

Nahiduzzaman, M., Hassan, M.M., Khanam, U.H., Mamuna, S.N.A., Hossain M.A.R. and Tiersch, T.R. 2011. Sperm cryopreservation of the critically endangered olive barb (Sarpunti) Puntius sarana (Hasemenon, 1822). Cryobiology 62: 62-67.

Pan, J., Ding, S., Ge, J., Yan, W., Hao, C., Chen, J. and Huang, Y. 2008. Development of cryopreservation for maintaining yellow catfish Pelteobagrus fulvidraco sperm. Aquaculture 279: 173-176.

Pewnane, P., Kongtarattana, S., Sodsuk, P.K. and Sodsuk, S. 2010. Cryopreservation of Julien’s golden java carp (Probarbus jullieni) spermatozoa. Journal of Fisheries Technology Research 4(1): 1-14. (in Thai)

Ratanatrivong, W., Taparhudee, W., Yoonpundh, R. and Srisapoome, P. 2011. Cryopreservation of bagrid catfish Hemibagrus wyckioides spermatozoa. Kasetsart University Fisheries Research Bulletin 35(2): 33-43.

Rideout, R.M., Litvak, M.K. and Trippel, E.A. 2003. The development of sperm cryopreservation protocol for winter flounder Pseudopleuronectes americanus (Walbaum): evaluation of cryoprotectants and diluents. Aquaculture Research 34 (8):653-659.

Rusco, G., Iorio, M.D., Iampietro, R., Esposito, S., Gibertoni, P.P., Penserini, M., Roncarati, A. and Iaffaldano, N. 2020. A simple and efficient semen cryopreservation method to increase the genetic variability of endangered Mediterranean brown trout inhabiting Molise Rivers. Animals 10(403): doi:10.3390/ani10030403.

Sansone, G., Fabbrocini, A., Ieropoli, S., Langellotti, A.L., Occidente, M. and Matassino, D. 2002. Effects of extender composition, cooling rate, and freezing on the motility of sea bass (Dicentrarchus labrax, L.) spermatozoa after thawing. Cryobiology 44(3): 229-239.

Viveiros, A.T.M., So, N. and Koman, J. 2000. Sperm cryopreservation of African catfish Clarias garieninus: cryoprotectants, freezing rate and sperm: egg dilution ratio. Theriogenology 54: 1395-1408.

Vuthiphandchai, V., Thadsri, I. and Nimrat, S. 2009. Chilled storage of walking catfish (Clarias macrocephalus) semen. Aquaculture 296: 58-64.

Vuthiphandchai, V., Wilairattanadilok, K., Chomphuthawach, S., Sooksawat, T. and Nimrat, S. 2015. Sperm cryopreservation of silver barb (Barbodes gonionotus): cryoprotectants, cooling rate and storage time on sperm quality. Aquaculture Research 46: 2443-2451.

Yang, S., Fan, B., Chen, X. and Meng, Z. 2020. Cryopreservation of sperm in brown-marbled grouper (Epinephelus fuscoguttatus). Aquaculture International 28: 1501-1516.

Young, J.A., Capra, M.F. and Blackshaw, A.W. 1992. Cryopreservation of summer whiting (Sillago ciliata) spermatozoa. Aquaculture 102: 155-160.