การคัดแยกและคัดกรองยีสต์สะสมไขมันสูงที่สามารถใช้กลีเซอรอล เป็นแหล่งคาร์บอน
Article Sidebar
Main Article Content
บทคัดย่อ
ยีสต์สะสมไขมันสูงเป็นผู้ผลิตไขมันที่มีศักยภาพสำหรับนำมาใช้ประโยชน์สำหรับการผลิตไบโอดีเซล การศึกษาครั้งนี้จึงได้ทำการเก็บตัวอย่างจากใบไม้และดินจากบริเวณป่าชายเลน จังหวัดชลบุรี แล้วนำมาคัดแยกยีสต์โดยใช้อาหารเลี้ยงเชื้อ YEPG broth ที่มีกลีเซอรอล 2 เปอร์เซ็นต์เป็นแหล่งคาร์บอนในขวดรูปชมพู่ภายใต้สภาวะแบบเขย่า พบว่าสามารถคัดแยกยีสต์ได้ทั้งหมด 26 ไอโซเลท จากนั้นนำยีสต์ที่คัดแยกได้มาวิเคราะห์ความสามารถในการสะสมไขมันโดยการย้อมด้วยสี Sudan Black B พบว่าจากยีสต์ทั้งหมด 26 ไอโซเลทที่คัดแยกได้ มียีสต์ 7 ไอโซเลท ได้แก่ 1A 2C 3E 5B 6A 8A และ 9A ที่มีถุงสะสมไขมันภายในเซลล์ จึงนำยีสต์ทั้ง 7 ไอโซเลทมาประเมินปริมาณไขมันภายในเซลล์ด้วยวิธี Nile Red fluorescence assay พบว่ายีสต์ไอโซเลท 1A ที่คัดแยกได้จากใบของต้นแสมดำแสดงศักยภาพในการสะสมไขมันสูงที่สุด เมื่อนำไอโซเลท 1A ไปศึกษาจลศาสตร์ของการผลิตชีวมวลและไขมัน พบว่าที่เวลา 240 ชั่วโมงของการเพาะเลี้ยงในอาหาร GMY broth ไอโซเลท 1A ผลิตชีวมวลได้ 24.24 ± 0.06 กรัมต่อลิตร สะสมไขมันได้ 3.63 ± 0.04 กรัมต่อลิตร คิดเป็นปริมาณไขมันสูงสุด 14.98 เปอร์เซ็นต์ของชีวมวลแห้งอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (p < 0.05) อย่างไรก็ตาม ควรที่จะต้องศึกษาเพิ่มเติมเพื่อปรับปรุงการผลิตไขมันของยีสต์ไอโซเลท 1A ก่อนที่จะนำไปประยุกต์ใช้ในอนาคต
Article Details
มหาวิทยาลัยรามคำแหง
เอกสารอ้างอิง
Burdon, K. 1946. Fatty material in bacteria and fungi revealed by staining dried, fixed slide preparations. J. Bacteriol. 52(6): 665-678.
Castanha, R. F., Morais, L. A. S. D., Mariano, A. P. and Monteiro, R. T. R. 2013. Comparison of two lipid extraction methods production methods produced by yeast in cheese whey. Braz. Arch. Biol. Technol. 56(4): 629-636.
Castrillón, M. R., Garcia, V. P. J., Rosa, P. D., Landell, M. F., Vu, D., Fabricio, M., Ayub, M. A. Z., Robert, V., Henriques, J. A. P. and Valente, P. 2017. The oleaginous yeast Meyerozyma guilliermondii BI281A as a new potential biodiesel feedstock: Selection and lipid production optimization. Front. Microbiol. 1776(8): 1-11.
Cuimin, H., Xin, Z., Jin, Z., Siguo, W. and Zongbao, K. Z. 2009. Effects of biomass hydrolysis by-products on oleaginous yeast Rhodosporidium toruloides. Bioresour. Technol. 100: 4843-4847.
Eamcharoen, A. and Rungrojchaipon, P. 2016. The conversion of glycerol to fuel additives. J. Sci. Ladkrabang. 25(2): 65-83.
Evan, C. T. and Ratledge, C. 1984. Influence of nitrogen metabolism on lipid accumulation in oleaginous yeasts. J. Gen. Microbiol. 130: 1693-1704.
Gientka, I., Gadaszewska, M., Blazejak, S., Kieliszek, M., Wrobel, B, A., Rozanska, S. L. and Kot, M. A. 2017. Evaluation of lipid biosynthesis ability by Rhodotorula and Sporobolomyces strains in medium with glycerol. Eur. Food Res. Technol. 243: 275-286.
Jape, A., Harsulkar, A. and Sapre, V. R. 2014. Modified Sudan Black B staining method for rapid screening of oleaginous marine yeasts. Int. J. Curr. Microbiol. Appl. Sci. 3(9): 41-46.
Jiru, T. M., Abate, D., Kiggundu, N., Pohl, C. and Groenewald, M. 2016. Oleaginous yeasts from Ethiopia. AMB Express. 6(1):78.
Kitcha, S. and Cheirsilp, B. 2011. Screening of oleaginous yeasts and optimization for lipid production using crude glycerol as a carbon source. Energy Procedia. 9: 274-282.
Kunthipun, S., Chokreansukchai, P., Hondee, P., Tanasupawat, S. and Savarajara, A. 2018. Diversity and characterization of cultivable oleaginous yeasts isolated from mangrove forests. World J. Microbiol. Biotechnol. 34: 125.
Li, Q., Du, W. and Liu, D. 2008. Perspectives of microbial oils for biodiesel production. Appl. Microbiol. Biotechnol. 80: 749-756.
Munch, G., Sestric, R., Sparling, R., Levin, B. D. and Cicek, N. 2015. Lipid production in the undercharacterized oleaginous yeasts, Rhodosporidium babjevae and Rhodosporidium diobovatum, from biodiesel-derived waste glycerol. Bioresour. Technol. 185: 49-55.
Papanikolaou, S. and Aggelis, G. 2011. Lipids of oleaginous yeasts. Part I: Biochemistry of single cell oil production. Eur. J. Lipid Sci. Tech. 113: 1031-1051.
Rakicka, M., Lazar, Z., Dulermo, T., Fickers, P. and Nicaud, J. M. 2015. Lipid production by the oleaginous yeast Yarrowia lipolytica using industrial by-products under different culture conditions. Biotechnol. Biofuels. 8: 104.
Santibañez, C., Varnero, M. T. and Bustamante, M. 2011. Residual glycerol from biodiesel manufacturing, waste or potential source of bioenergy: A review. Chil. J. Agr. Res. 71(3): 469-475.
Sitepu, I. R., Garay, L. A., Sestric, R., Levin, D., Block D. E., German, J. B. and Boundy-Mills, K. L. 2014. Oleaginous yeasts for biodiesel: Current and future trends in biology and production. Biotechnol. Adv. 32(7): 1336-1360.
Sitepu, I. R., lgnatia, L., Franz, A. K., Wong, D. M., Faulina, S. A., Tsui, M., Kanti, A. and Boundy-Mills, K. 2012. An improved high-throughput Nile red fluorescence assay for estimating intracellular lipids in a variety of yeast species. J. Microbiol. Meth. 91: 321-328.
Tapia, E. V., Anschau, A. A., Coradini, A. L., and Deckmann, A. C. 2012. Optimization of lipid production by the oleaginous yeast Lipomyces starkeyi by random mutagenesis coupled to cerulenin screening. AMB Express. 2: 64.
