การตรวจสอบการปนเปื้อนแบคทีเรียในกุ้งแช่แข็งด้วยมัลติเพล็กซ์พีซีอาร์

Abstract

บทคัดย่อ

เทคนิคมัลติเพล็กซ์พีซีอาร์แบบไม่สกัดแยกดีเอ็นเอได้พัฒนาขึ้นเพื่อตรวจสอบการปนเปื้อนแบคทีเรียในกุ้งแช่แข็ง โดยออกแบบไพรเมอร์สำหรับเพิ่มปริมาณชิ้นดีเอ็นเอเป้าหมายของแบคทีเรีย 3 ชนิด ได้แก่ Escherichia coli, Vibrio cholerae และ Salmonella enterica serovar Typhi ผลการวิจัยพบว่าเทคนิคมัลติเพล็กซ์พีซีอาร์ที่พัฒนาขึ้นเพื่อใช้ในการวิจัยครั้งนี้มีความจำเพาะต่อแบคทีเรียเป้าหมาย และมีความไวของการตรวจสอบในกุ้งแช่แข็งได้ถึง 10⁴เซลล์/กรัม

คำสำคัญ : มัลติเพล็กซ์พีซีอาร์; การปนเปื้อนแบคทีเรีย; กุ้งแช่แข็ง; อีโคไล; วิบริโอ; ซัลโมเนลลา

Abstract

Multiplex polymerase chain reaction technique without DNA extraction was developed for the detection of bacterial contamination in frozen shrimp. Three primer pairs were designed to amplify the target DNA fragments of Escherichia coli, Vibrio cholerae and Salmonella enterica serovar Typhi. The results show that the new method of multiplex PCR technique in this study was specificity to the targeted bacteria and the sensitivity in frozen shrimp was as high as 10⁴ cell/gram.

Keywords: multiplex PCR; bacterial contamination; frozen shrimp; E. coli; V. cholera; S. Typhi