การประยุกต์เทคนิคพีซีอาร์เพื่อตรวจสอบแบคทีเรียซัลโมเนลลาในน้ำดื่ม

Abstract

บทคัดย่อ

ได้พัฒนาเทคนิคพีซีอาร์เพื่อตรวจสอบแบคทีเรียซัลโมเนลลาที่ปนเปื้อนในน้ำดื่มด้วยวิธีที่ไม่ต้องสกัดแยกดีเอ็นเอจากแบคทีเรีย  โดยออกแบบไพรเมอร์เพื่อเพิ่มปริมาณชิ้นส่วนของยีนอินเวชัน  ผลการวิจัยพบว่าเทคนิคพีซีอาร์ที่พัฒนาขึ้นเพื่อใช้ในการวิจัยครั้งนี้มีความจำเพาะต่อแบคทีเรียซัลโมเนลลาสูงและมีความไวของการตรวจสอบแบคทีเรียซัลโมเนลลาที่ปนเปื้อนในน้ำดื่ม 10⁴ เซลล์/มิลลิลิตร  ซึ่งสามารถเพิ่มความไวของการตรวจสอบได้ด้วยการเพิ่มปริมาณแบคทีเรียในอาหารเหลวในระยะเวลาที่เหมาะสมก่อนนำไปทำพีซีอาร์

คำสำคัญ : พีซีอาร์; การตรวจสอบแบคทีเรีย; ซัลโมเนลลา; น้ำดื่ม

Abstract

Polymerase chain reaction (PCR) technique without DNA extraction was developed for the detection of Salmonella in drinking water. Primer pairs were designed for amplification of DNA fragment of invasion (InvA) gene. The results showed that the new method of PCR technique in this study was specific to Salmonella with the sensitivity of at less 10⁴ cells/ml and capable to enhance by growing bacterial cell in culture broth before amplification.

Keywords: PCR; bacterial detection; Salmonella; drinking water