การประเมินความสัมพันธ์ทางพันธุกรรมและการจำแนกหม้อข้าวหม้อแกงลิงด้วยเทคนิคแฮตอาร์เอพีดี

Abstract

บทคัดย่อ

หม้อข้าวหม้อแกงลิงเป็นพืชกินแมลงชนิดหนึ่งที่ได้รับความสนใจในการเพาะเลี้ยงเป็นลำดับต้น ๆ แต่ปัจจุบันยังมีข้อมูลเกี่ยวกับความสัมพันธ์ทางพันธุกรรมของพืชสกุลนี้ไม่มากนัก ดังนั้นงานวิจัยนี้จึงใช้เทคนิคแฮตอาร์เอพีดีในการจำแนกหม้อข้าวหม้อแกงลิง จำนวน 8 ตัวอย่าง ซึ่งประกอบด้วยพันธุ์แท้ 5 ชนิด และลูกผสม 3 ตัวอย่าง โดยเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอของหม้อข้าวหม้อแกงลิงด้วยไพรเมอร์แบบสุ่ม 72 สาย พบว่าไพรเมอร์ 15 สาย ให้ลายพิมพ์ ดีเอ็นเออย่างชัดเจน เมื่อนำไพรเมอร์ทั้ง 15 สาย มาตรวจสอบดีเอ็นเอของหม้อข้าวหม้อแกงลิงแต่ละตัวอย่าง พบว่าสามารถแยกความแตกต่างระหว่างตัวอย่างได้ด้วยแถบดีเอ็นเอที่จำเพาะ นอกจากนี้ยังพบไพรเมอร์แบบสุ่ม C24 ที่สามารถจำแนกหม้อข้าวหม้อแกงลิงทั้ง 8 ตัวอย่าง ได้โดยใช้ไพรเมอร์เพียงสายเดียว เมื่อวิเคราะห์ความสัมพันธ์ทางพันธุกรรมพบว่ามีค่าสัมประสิทธิ์ความเหมือนอยู่ระหว่าง 0.52 ถึง 0.83

คำสำคัญ : หม้อข้าวหม้อแกงลิง; การจำแนก; ความสัมพันธ์ทางพันธุกรรม; แฮตอาร์เอพีดี

Abstract

Nepenthes as a carnivorous plant type, which has been reported to be on top of plat culture list. However it is lack of knowledge about the genetic relationships of this genus. This research, we used the high annealing temperature-random amplified polymorphic DNA (HAT-RAPD) technique to identify 8 samples (5 species and 3 hybrids) of Nepenthes. Seventy-two random primers were screened and 15 primers gave clear amplified products and these primers were used to analyze all samples. These results showed polymorphism among 8 samples with specific DNA bands. In addition, we found that the random primer C24 can be used to separate all samples from each other by using only one primer. The dendrogram constructed based on polymorphic bands showed genetic similarities among 8 samples with similarity coefficients ranging from 0.52 to 0.83.

Keywords: Nepenthes; identification; genetic relationship; HAT-RAPD