วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงอย่างง่ายสำหรับการวิเคราะห์เซฟาโซลินในกระดูก

Abstract

บทคัดย่อ

วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงที่มีการตรวจวัดแบบโฟโตไดโอดอาเรย์ได้ถูกพัฒนาขึ้นสำหรับการวิเคราะห์หาปริมาณเซฟาโซลินในกระดูกมนุษย์ โดยในการแยกจะใช้คอลัมน์ชนิด C18 ร่วมกับการใช้เฟสเคลื่อนที่ผสมระหว่างอะซิโตไนไตรล์และกรดฟอร์มิกเข้มข้นร้อยละ 0.1 โดยปริมาตร สัดส่วน 20 : 80 ที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตรต่อนาที ภายใต้สภาวะที่เหมาะสม การประเมินความใช้ได้ของวิธีวิเคราะห์ พบว่าวิธีนี้มีความไว ความเที่ยงและความแม่นสูง โดยกราฟมาตรฐานระหว่างอัตราส่วนของพื้นที่ใต้พีคของเซฟาโซลินและกรดซาลิไซลิก (สารมาตรฐานภายใน) มีความสัมพันธ์เป็นเส้นตรงในช่วงความเข้มข้นของเซฟาโซลิน 0.05-70 มิลลิกรัมต่อลิตร (ค่าสัมประสิทธิ์ความเป็นเส้นตรง มากกว่า 0.9995) ขีดจำกัดของการตรวจวัดและการหาปริมาณ มีค่าเท่ากับ 0.03 และ 0.05 มิลลิกรัมต่อลิตร ตามลำดับ วิธีนี้มีความเที่ยงเป็นที่น่าพอใจ ทั้งการทำซ้ำแบบภายในวันเดียวกันและแบบระหว่างวัน โดยมีค่าส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ร้อยละ 1.82 และ 3.11 (n = 10) ตามลำดับ การประเมินความแม่นของวิธีอาศัยค่าร้อยละการกลับคืนของปริมาณสารที่เติมเทียบกับปริมาณสารที่วิเคราะห์ได้ พบว่ามีค่าอยู่ในช่วง 97-101 วิธีที่พัฒนาขึ้นนี้ ได้นำไปประยุกต์ใช้ในการหาปริมาณเซฟาโซลินในยาเซฟาโซลินสำหรับฉีดในกระดูกแข้งและกระดูกต้นขาของมนุษย์

คำสำคัญ : เซฟาโซลิน; โครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง; กระดูก; กระดูกแข้ง; กระดูกต้นขา; ยาเซฟาโซลินสำหรับฉีด

Abstract

A simple reverse phase – high performance liquid chromatography-photodiode array detection (RP-HPLC-DAD) method for quantitative analysis of cefazolin in human bone was developed. For component separation, the method utilized a C18 column with isocratic elution of an aqueous mobile phase of acetonitrile and 0.1 % (v/v) formic acid (80 : 20) at a flow rate of 1 ml/min. Under the optimal condition, validation of the method demonstrated a good sensitivity, precision and accuracy. The calibration curve was linear for a plot between the peak area ratio of cefazolin and salicylic acid (internal standard), ranging from 0.05-70 mg/L (R² > 0.9995). The limits of detection and quantitation were 0.03 and 0.05 mg/L, respectively. The developed method gave satisfactory precision in terms of intraday and interday with RSD of 1.82 and 3.11 (n = 10), respectively. The accuracy of the method was reported as the recovery of nominal spiked amounts versus measured component concentrations. The recoveries were in the range of 97-101 %. The developed method has been applied to determine cefazolin content in cefazolin for injection and the human bone such as tibia and femur. 

Keywords: cefazolin; high performance liquid chromatography; bone; tibia; femur; cefazolin for injection