การชักนำให้เกิดแคลลัสและปริมาณสารต้านอนุมูลอิสระของแคลลัสรางจืด
Article Sidebar
Main Article Content
บทคัดย่อ
รางจืด (Thunbergia laurifolia Lindl.) เป็นพืชสมุนไพรที่ดอกและใบมีสารอนุมูลอิสระสูง ใช้กำจัดสารพิษในร่างกาย การเพาะเลี้ยงแคลลัสเป็นรูปแบบหนึ่งของการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชเพื่อผลิตสารทุติยภูมิ ดังนั้นในการทดลองครั้งนี้จึงมีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาผลของ 2,4-D, NAA และ BA ความเข้มข้นต่าง ๆ ต่อการชักนำให้เกิดแคลลัสจากชิ้นส่วนใบรางจืดที่พัฒนาในสภาพปลอดเชื้อ และปริมาณสารต้านอนุมูลอิสระของแคลลัสเมื่อเพาะเลี้ยงเป็นระยะเวลาต่างกัน เปรียบเทียบกับยอดที่พัฒนาในสภาพปลอดเชื้อและใบที่เจริญเติบโตเต็มที่ในสภาพธรรมชาติ การเพาะเลี้ยงชิ้นส่วนใบที่ตัดจากยอดที่พัฒนาในสภาพปลอดเชื้อบนอาหารสูตร MS ที่เติม 2,4-D และ NAA ความเข้มข้น 0.5-1.0 mg/L เพียงอย่างเดียว หรือร่วมกับ BA ความเข้มข้น 0.5 mg/L เปรียบเทียบกับอาหารสูตร MS ที่ไม่เติมสารควบคุมการเจริญเติบโต (สิ่งทดลองควบคุม) เป็นเวลา 6 สัปดาห์ พบว่าชิ้นส่วนใบพัฒนาเป็นแคลลัสได้บนอาหารทุกสูตรยกเว้นสิ่งทดลองควบคุม โดยแคลลัสที่พัฒนาบนอาหารสูตร MS ที่เติม NAA ความเข้มข้น 0.5-1.0 mg/L ร่วมกับ BA ความเข้มข้น 0.5 mg/L และ 2,4-D ความเข้มข้น 0.5 mg/L ร่วมกับ BA ความเข้มข้น 0.5 mg/L มีน้ำหนักสดและแห้งสูงกว่าและแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญกับอาหารสูตรอื่น เมื่อนำแคลลัสของรางจืดที่เพาะเลี้ยงบนอาหารสูตร MS ที่เติม NAA ความเข้มข้น 0.5 mg/L และ BA ความเข้มข้น 0.5 mg/L เป็นระยะเวลา 4, 5 และ 6 สัปดาห์ มาวิเคราะห์หาปริมาณสารต้านอนุมูลอิสระเปรียบเทียบกับยอดรางจืดที่พัฒนาในสภาพปลอดเชื้อ และใบจากต้นที่เจริญเติบโตเต็มที่ในสภาพธรรมชาติ พบว่าแคลลัสที่เพาะเลี้ยงนาน 4-6 สัปดาห์ และยอดที่พัฒนาในสภาพปลอดเชื้อ มีปริมาณสารประกอบฟีนอลิคทั้งหมด 64.41±1.29 ถึง 67.29±3.17 mg GAE/g dry extract สารฟลาโวนอยด์ 44.38±11.61 ถึง 54.60±9.22 mg CE/g dry extract และฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ DPPH โดยมีค่า EC50 15.93±1.33 ถึง 18.99±0.86 µg/mL สูงกว่าค่าดังกล่าวของใบที่เจริญเติบโตเต็มที่ในสภาพธรรมชาติอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ
Article Details
เอกสารอ้างอิง
Chan, E.W.C., Eng, S.Y., Tan, Y.P. and Wong, Z.C., 2011, Phytochemistry and pharmacological properties of Thunbergia laurifolia: A review, Phcog. J. 3: 1-6.
Thongsaard, W. and Marsden, C.A., 2002, A herbal medicine used in the treatment of addiction mimics the action of amphetamine on in vitro rats trial dopamine release, Neurosci. Lett. 329: 129-132.
Oonsivilai, R., Ferruzzi, M.G. and Ningsanond, S., 2008, Antioxidant activity and cytotoxicity of Rang Chuet (Thunbergia laurifolia Lindl.) extracts, Asian J. Food Ag-Ind. 1: 116-28.
Jirakiattikul, Y., Rithichai, P., Patchaika, S. and Songserm, K., 2018, In vitro propagation of Thunbergia laurifolia Lindl., Songklanakarin J. Plant Sci. 5: 18-24. (in Thai)
Ramachandra Rao, S. and Ravishankar, G. A., 2002, Plant cell cultures: Chemical factories of secondary metabolites, Biotechnol. Adv. 20: 101-153.
Phillips, G.C. and Garda, M., 2019, Plant tissue culture media and practices: An overview, In vitro Cell. Develop. Biol. Plant 55: 242-257.
Kumar, M. and Nandi, S., 2014, Analysis of organogenic callus from internode explants of Asteracantha longifolia Nees, J. Genet. Eng. Biotechnol. 13: 31-37.
Yaacob, J., Taha, R., Jaafar, N., Hasni, Z., Elias, H. and Mohamed, N., 2013, Callus induction, plant regeneration and somaclonal variation in in vivo and in vitro grown white shrimp plant (Justicia betonica Linn.), Aust. J. Crop Sci. 7: 281-288.
Banthorpe, B.V., 1994, Secondary metabolism in plant tissue culture: Scope and limitations, Nat. Prod. Rep. 11: 303-328.
Boonyuen, T., Jirakiattikul, Y., Rithichai, P., Ruangnoo, S. and Itharat, A., 2014, Dioscorealide B content of in vitro Khao-Yen-Tai (Dioscorea membranacea Pierre ex Prain & Burkill) shoots at different culture periods, Khon Kaen Agric. J. 42(Suppl. 3): 306-310. (in Thai)
Chen, H. and Chen, F., 2000, Effects of yeast elicitor on the growth and secondary metabolism of a high-tansshinone-producing line of the Ti transformed Salvia miltiorrhiza cells in suspension culture, Proc. Biochem. 35: 837-840.
De, D. and De, B., 2005, Elicitation of diosgenin production in Dioscorea floribunda by ethylene-generating agent, Fitoterapia 76: 153-156.
Jirapongpattana, R., Jirakiattikul, Y., Rithichai, P., Ruangnoo, S. and Itharat, A., 2016, Secondary metabolite contents of in vitro Hua-Khao-Yen (Dioscorea birmanica Prain & Burkill) shoots at different culture periods, Thai Sci. Technol. J. 24(1): 40-48. (in Thai)
Jaiarree, N., 2010, Biological Activities of Dioscorea birmanica Prain & Burkill Extract and Its Active Ingredients, Doctoral Disseration, Faculty of Medicine, Thammasat University, Pathum Thani.
Folin, O. and Ciocalteu, V., 1927, On tyrosine and tryptophan determination in proteins, J. Bio. Chem. 27: 627-650.
Zhu. H., Wang. Y., Liu, Y., Xia, Y. and Tang, T., 2010, Analysis of flavonoids in Portulaca oleracea L. by UV-Vis spectrophotometry with comparative study on different extraction technologies, Food Anal. Methods 3: 90-97.
Yamasaki, K., Hashimoto, A., Kokusenya, Y., Miyamoto, T. and Sato, T., 1994, Electrochemical method for estimating the antioxidantive effect of methanol extracts of crude drugs, Chem. Pharm. Bull. 42: 1663-1665.
Autaijamsripon, J., Jirakiattikul, Y., Rithichai, P. and Itharat, A., 2017, Effect of culture periods on secondary metabolite contents and antioxidant activity of in vitro Bacopa monnieri shoots, Thai Sci. Technol. J. 25(3): 443-452. (in Thai)
Razdan, M.K., 2002, Introduction to Plant Tissue Culture, 2nd Ed., Science Publishers, Enfield. 375 p.
Lashin, I.I. and Elhaw, M.H., 2016, Evaluation of secondary metabolites in callus and tissue of Physalis peruviana, IJMB 6: 10-17.
Shilpashree, H.P. and Ravishankar, R., 2009, In vitro plant regeneration and accumulation of flavonoids in Hypericum mysorense, Int. J. Integr. Biol. 8: 43-49.
