การระบุชนิดของพืชสกุลกัญชาโดยใช้เครื่องหมายดีเอ็นเอ
Article Sidebar
Main Article Content
บทคัดย่อ
พืชสกุลกัญชา มีสารออกฤทธิ์หลักกลุ่มแคนนาบินอยด์ ได้แก่ เตตร้าไฮโดรแคนนาบินอล (tetra-9-Tetrahydrocannabinol; THC) และแคนนาบิไดออล (Cannabidiol; CBD) ทำให้สามารถแบ่งกลุ่มตามปริมาณสาร THC และ CBD ดังนั้นงานวิจัยนี้นำเทคนิคทางโมเลกุลมาใช้ระบุกลุ่มของพืชสกุลกัญชาสายพันธุ์หางกระรอกภูพาน พบว่าจัดอยู่ในแบบที่ 2 (type 2) คือมียีนที่สังเคราะห์สารทั้ง THC และ CBD จากนั้นนำมาใช้ในการชักนำให้เกิดแคลลัส จากชิ้นส่วนใบที่ได้จากการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเมล็ดพืชสกุลกัญชาบนอาหารสังเคราะห์สูตรของ Murashige and Skoog (MS) ที่ไม่มีการเติมสารควบคุมการเจริญ เป็นระยะเวลา 4 สัปดาห์ จากนั้นนำชิ้นส่วนของใบในสภาพปลอดเชื้อไปชักนำให้เกิดแคลลัสในอาหารสังเคราะห์สูตร MS ที่มีการเติมสารควบคุมการเจริญกลุ่มออกซินชนิด 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) ที่ความเข้มข้น 0.5 1 และ 2 มิลลิกรัมต่อลิตร เป็นระยะเวลา 4 สัปดาห์ พบว่าทุกชุดการทดลองสามารถชักนำให้เกิดแคลลัสได้ และที่ความเข้มข้น 2,4-D 0.5 และ 1.0 มิลลิกรัมต่อลิตร จะให้แคลลัสที่มีขนาดใหญ่ที่สุด มีสีเขียวและเป็นชนิดเกาะกันแน่น ดังนั้นงานวิจัยนี้จึงสามารถระบุชนิดของพืชสกุลกัญชา และสามารถชักนำให้เกิดแคลลัส ซึ่งสามารถใช้เป็นข้อมูลสำหรับการขยายพันธุ์ และการผลิตสารทุติยภูมิ
Article Details
เอกสารอ้างอิง
Russo EB., 2008, Cannabinoids in the management of difficult to treat pain. Ther Clin Risk Manag. 4(1): 245-59.
Atakan Z., 2012. Cannabis, a complex plant: different compounds and different effects on individuals. Ther Adv Psychopharmacol. 2(6): 241–254.
Stéphane, F. F. Y. , Jules, B. K. J. , Batiha, G. E. , Ali, I., & Bruno, L. N., 2021. Extraction of Bioactive Compounds from Medicinal Plants and Herbs. Nat Med Plants.
Dias, M.I., Sousa, M.J., Alves, R.C., and Ferreira, I.C.F.R., 2016, Exploring plant tissue culture to improve the production of phenolic compounds: A review. Ind. Crops Prod.. 82: 9-22.
Saw, N.M.M.T., Riedel, H., Cai, Z., Kütük, O., and Smetanska, I., 2012, Stimulation of anthocyanin synthesis in grape (Vitis vinifera) cell cultures by pulsed electric fields and ethephon. Plant Cell Tissue Organ Cult.. 108(1): 47-54.
Erly Marwani, D.P., Karlina Wardhani, and Rizkita Esyanti, 2015, Development of hairy root culture of Andrographis paniculata for in vitro adrographollide Pproduction. J. Med. Biol. Eng. 4(6): 446-450.
Loc, N.H. and Nhat, N.T.D., 2013, Production of asiaticoside from centella (Centella asiatica L. Urban) cells in bioreactor. Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine. 3(10): 806-810.
Wielgus, K., Luwanska, A., Lassocinski, W., and Kaczmarek, Z., 2008. Estimation of Cannabis sativa L. Tissue Culture Conditions Essential for Callus Induction and Plant Regeneration. J. Nat. Fibers. 5(3): 199-207.
Staginnus C., Zörntlein S., de Meijer E., 2014. A PCR marker linked to a THCA synthase polymorphism is a reliable tool to discriminate potentially THC-rich plants of Cannabis sativa L. J. Forensic Sci. 59:919–926.
Pacifico D., Miselli F., Micheler M., Carboni A., Ranalli P., Mandolino G., 2006. Genetics and marker-assisted selection of the chemotype in Cannabis sativa L. Mol. Breed. 17:257–268.
Meijer E.P.M., Hammond K.M., Sutton A., 2009. The inheritance of chemical phenotype in Cannabis sativa L. (IV): Cannabinoid-free plants. Euphytica. 168:98–112.
Doyle, J.J. and Doyle, J.L., 1987 .A rapid DNA isolation procedure for small quantities of fresh leaf tissue. Phytochemical bulletin, 19(1), 11-15.
Yamamuro, T., Segawa, H., Kuwayama, K., Tsujikawa, K., Kanamori, T., & Iwata, Y. T., 2021. Rapid identification of drug-type and fiber-type cannabis by allele specific duplex PCR. Forensic Sci. Int. 318: 110634.
Welling, M.T., Liu, L., Shapter, T. Raymond, C.A. and King G.J., 2016. Characterisation of cannabinoid composition in a diverse Cannabis sativa L. germplasm collection. Euphytica. 208, 463–475.
Murashige, T. and Skoog, F. 1962. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures. Physiol. Plant. 15:473-479.
Pussapaphan, N. and Busabong, W. (2022) Cannabis in the traditional Southern Thai medical recipe. Asian J Trad Inno Arts and Textiles. 1(2): 31-60.
Kumar, K.R., Singh, K.P., Raju, D.V.S., Bhatia, R. and Panwar, S., 2019. Influence of genotypes, growth regulators and basal media on direct differentiation of shoot buds from leaf segments of marigold (Tagetes spp.). Indian J. Exp. Biol. 57(1): 30-39.
Srirat, P., Prammanee, S., Sirisansaneeyakul, S., Parakulsuksatid P. and Vanichsriratana, W. 2017. Callus Induction of Curcuma longa L. and Effect of Precursor Addition on Curcuminoids Production. SDU Res. J. 10 (2): 115-132.
Thawaro, S. and Te-chato, S. 2009. Application of molecular markers in the hybrid verification and assessment of somaclonal variation from oil palm propagated in vitro. Sci Asia, 35(2): 142-149.
