พัฒนาการตรวจเชื้อ Staphylococcus aureus ในตัวอย่างน้ำอย่างรวดเร็วด้วยเทคนิค Real-time PCR
Article Sidebar
Main Article Content
บทคัดย่อ
จุลินทรีย์ที่ปนเปื้อนในน้ำที่สำคัญได้แก่ Staphylococcus aureus (S. aureus), Escherichia coli , Salmonella sp. ซึ่งแบคทีเรียเชื้อ S. aureus ที่ทำให้เกิดโรคทางเดินอาหารเป็นพิษ พบได้ทั่วไปอยู่ตามผิวหนัง ทางเดินหายใจ บาดแผลของมนุษย์ การตรวจวินิจฉัยโดยการเพาะเลี้ยงเชื้อและทดสอบตามวิธีทางชีวเคมีประมาณ 3 วัน และต้องอาศัยผู้เชี่ยวชาญทางด้านจุลินทรีย์ในการแยกและจำแนกชนิดเชื้อ งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนาเทคนิค Real time PCR เพื่อตรวจวิเคราะห์หาเชื้อ S. aureus ที่ปนเปื้อนในน้ำเป็นวิธีที่มีความจำเพาะต่อดีเอ็นเอของเชื้อแต่ละชนิดและเป็นปฏิกิริยาที่มีความไวสูงสามารถตรวจสอบเชื้อที่ต้องการในปริมาณเพียงเล็กน้อย โดยสามารถตรวจสอบการปนเปื้อนเชื้อได้ที่ปนเปื้อน 4200 CFU/mLโดยไม่ต้องนำไปบ่มเพิ่มปริมาณเชื้อ และใช้เวลาในการตรวจสอบที่สั้นประมาณ 45 นาที ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าเทคนิค Real time PCR ที่พัฒนาขึ้นมีความไวและจำเพาะสูงซึ่งสามารถประยุกต์ใช้ในการตรวจหาเชื้อ S. aureus ในตัวอย่างน้ำได้
Article Details
เอกสารอ้างอิง
Amala, E. and Aleru, P. 2016. Bacteriological quality of swimming pools water in port harcourt metropolis. Nat. Sci., 08,79-84.
American Public Health Association – APHA. 2005. Standard Methods for the Examination of Water and Waste Water, 21st Edition, APHA, AWWA, WEF, Washington DC, USA.
Argudín, M.Á.; Mendoza, M.C.; Rodicio, M.R. Food Poisoning and Staphylococcus aureus Enterotoxins. Toxins 2010, 2, 1751–1773.
Borelli, B.M., Lacerda, I.C. and Brando, L.R., 2011, Identification of Staphylococcus spp. Isolated during the ripening process of a traditional Minas cheese. Arq. Brs. Med. Vet. Zootec. 63: 481-487.
Eiseul, K., Seung-Min, Y., Ji-Eun, W., Da-Young, K., Da-Som, K. and Hae-Yeong, K., 2021. Real-Time PCR Method for the Rapid Detection and Quantification of Pathogenic Staphylococcus Species Based on Novel Molecular Target Genes. Foods. 10(11):1-15.
Evidence-based medicine on Diagnostic study, Available Source: https://www.rama.Mahidol.ac.th, December 5, 2023. (in Thai)
Gavin, K. P., Ewan, M.H. and Mark, A.H., 2014, The emergence of mec methicillin-resistant Staphylococcus aureus. Trends in Microbiology. 22(1): 42-47.
Goto, M., Takahashi, H., Segawa, Y., Hayashidani, H., Takatori, K., Hara-Kudo, Y. 2007, Real-Time PCR Method for Quantification of Staphylococcus aureus in Milk. J Food Prot. 70 (1): 90–96.
Haniyeh, G.,Hamed, A., Amirali, A.,Delavar, S., 2020. Detection of Staphylococcus aureus Enterotoxin A (SEA) Using Dot-ELISA in Milk Samples. J Med Microbiol Infect Dis, 2020; 8 (4): 132-136.
Katsutoshi, S., Teiichi, M., Midori, K. 1997, Rapid identification and typing of Staphylococcus aureus by nested PCR amplified ribosomal DNA spacer region. FEMS Microbiology Letters.146(2): 271–278.
Liliana, G., Marco, L., Anna, B. and Annarita, M., 2019. Real-time PCR assay for detection of Staphylococcus aureus, Panton-Valentine Leucocidin and Methicillin Resistance directly from clinical samples. AIMS Microbiol. 5(2): 138–146.
Muhammad, A.Q., Shahid, S., Abdul, W. et al. 2019, Molecular analysis of Staphylococcus aureus isolated from infected dairy goats, Journal of Veterinary Medicine.49(4): 361-367. (in Thai)
Narumol, T. and Theerachai, T. 2012. Detection of Staphylococcus aureus Using Polymerase Chain Reaction, Journal of Science and Technology. 121-126. (in Thai)
Odd, G., Brakstad, l., Kjetill, A. and Johan, A., 1992. Detection of Staphylococcus aureus by polymerase chain reaction amplification of the nuc gene. J Clin Microbiol. 30(7):1654-60.
Rajeh, A.K., Ayman, A.M., Mazen, S. 2014, Role of Polymerase Chain Reaction (PCR) in the detection of antibiotic-resistant Staphylococcus aureus Egyptian, Journal of Medical Human Genetics.15(3): 293-298.
Sasaki T, et al. Multiplex-PCR method for species identification of coagulase-positive staphylococci. J Clin Microbiol 2010;48:765–769.
Shashank, S., Saleha, A., Hemant, K., Upendra, C. and Sunil, V., 2014. FemA gene in Indian isolates of methicillin resistant Staphylococcus aureus isolation and amplification through real time PCR. European Journal of Experimental Biology. 4(6):90-94.
Tasci, F., Sahindokuyucu, F. and Ozturk, D., 2011. Detection of Staphylococcus species and staphylococcal enterotoxins by ELISA in ice cream and cheese consumed in Burdur Province, Afr. J. Agr;6: 937-942.
Yousun, C., Taek, S., Young, M., Yun, H., Jeong, P., Sang, H., Kyoung, S., Suk, K., Kyoung, P., Hong, K., Junghan, S. and EuiChong, K., 2016. Use fulness of Multiplex Real-Time PCR for Simultaneous Pathogen Detection and Resistance Profiling of Staphylococcal Bacteremia, BioMed Research International. 3860, 1-7.
Yu, J., Zhang, Y., Zhang, Y., Li, H., Yang, H., and Wei, H. (2016). Sensitive and rapid detection of staphylococcus aureus in milk via cell binding domain of lysin. Biosens. Bioelectron. 77, 366–371.
