ผลของการเสริมสารสกัดกัญชงในน้ำยาเจือจางน้ำเชื้อโคแช่แข็ง ต่อคุณภาพของอสุจิหลังการละลาย
Main Article Content
บทคัดย่อ
การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาผลของการเสริมสารสกัดกัญชงในน้ำยาแช่แข็งน้ำเชื้อโคต่อคุณภาพอสุจิโคหลังการละลาย โดยมีน้ำยาเจือจางน้ำเชื้อโคพื้นฐานที่ใช้ไข่แดง (Tris-egg yolk: EG) เป็นกลุ่มควบคุม แบ่งออกเป็น 2 การทดลองคือ การทดลองที่ 1 การทดสอบการเปลี่ยนแปลงของค่าความดันออสโมติกของน้ำยาเจือจางน้ำเชื้อโคที่เสริมสารสกัดกัญชงที่ระดับ 5, 10, 50 และ 100 µg CBD/mL ตามลำดับ ในการเก็บรักษาน้ำยาเจือจางน้ำเชื้อโคที่อุณหภูมิ 4องศาเซลเซียส ระยะเวลาการเก็บรักษาที่ 0, 12, 24, 48, 72, 96, 120, 144 ชั่วโมง และ 1 สัปดาห์ พบว่า ค่าความดันออสโมติกของทุกกลุ่มการทดลองมีค่าความดันออสโมติกที่เหมาะสำหรับแช่แข็งอสุจิของโคและไม่กระทบต่อคุณภาพการผลิตน้ำเชื้อโคแช่แข็ง การทดลองที่ 2 การเสริมสารสกัดกัญชงในน้ำยาเจือจางน้ำเชื้อโคแช่แข็งต่อคุณภาพตัวอสุจิภายหลังการละลาย ที่ระดับความเข้มข้น 5, 10, 50 และ 100 µg CBD/mL ตามลำดับโดยทดสอบในน้ำเชื้อพ่อโคนมพันธุ์ทรอปปิคอลโฮลสไตน์ (Tropical Holstein: TH) จำนวน 3 ตัว ทำการเจือจางน้ำเชื้อที่ระดับความเข้มข้นอสุจิ 20 ล้านตัวต่อหลอด และบรรจุใส่หลอดน้ำเชื้อ (ministraw) ขนาด 0.25 มิลลิลิตร บ่มที่อุณหภูมิ 4 และ -121 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 4 ชั่วโมง และ 15 นาที ตามลำดับ และเก็บรักษาน้ำเชื้อในไนโตรเจนเหลวที่อุณหภูมิ -196 องศาเซลเซียส จากนั้นทำการประเมินคุณภาพน้ำเชื้อด้วยเครื่อง Computer Assisted Sperm Analysis (CASA) ที่เวลา 24 ชั่วโมง 1 สัปดาห์ 2 สัปดาห์ และ 1 เดือน หลังแช่แข็ง พบว่า การเสริมสารสกัดจากกัญชงระดับ CBD 5 µg/mL ส่งผลต่อการเคลื่อนที่ของอสุจิ (49.43 เปอร์เซ็นต์) มากกว่ากลุ่มควบคุมอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P < 0.05) สำหรับผลสัณฐานวิทยาของอสุจิ การเสริมสารสกัดจากกัญชงระดับ CBD 5 µg/mL ในน้ำยาเจือจางน้ำเชื้อ พบว่า มีอสุจิที่มีความผิดปกติในลักษณะหางคดและอสุจิที่มีหยดน้ำเกาะที่บริเวณกลางตัว น้อยกว่ากลุ่มควบคุมอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P < 0.05) สรุปการใช้น้ำยาเจือจางน้ำเชื้อโคที่มีสารสกัดจากกัญชงเป็นส่วนประกอบที่ระดับความเข้มข้น CBD 5 µg/mL มีแนวโน้มคุณภาพอสุจิที่ดีในการนำมาใช้เป็นสารเสริมในการทำน้ำยาแช่แข็งน้ำเชื้อพ่อพันธุ์โคนม
Article Details
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.
References
Ahmadi, E., H. Nazari, N. Davoodian and A. Kadivar. 2020. Feasibility of long-term ovine epididymal spermatozoa preservation in a simple extender containing egg yolk. Journal of Livestock Science and Technologies 8(1): 59-67.
Alagbonsi, A.I., L.A. Olayaki, H.A. Abdulrahim, T.S. Adetona and G.T. Akinyemi. 2019. Cannabinoid-deficient Benin republic hemp (Cannabis sativa L.) improves semen parameters by reducing prolactin and enhancing anti-oxidant status. BMC Complementary and Alternative Medicine 19(1): 132, doi: 10.1186/s12906-019-2541-5.
Apimeteetumrong, M., J. Chansaad, B. Jongrakwattana, W. Khacheerum, A. Chumkaew and N. Leangcharuen. 2013. Pregnancy rate after timed insemination in goats synchronized for estrous for with short-term protocol. Agricultural Science Journal 44 1(Suppl.): 207-210. (in Thai)
Baumber, J., B.A. Ball, C.G. Gravance, V. Medina and M.C. Davies-Morel. 2000. The effect of reactive oxygen species on equine sperm motility, viability, acrosomal integrity, mitochondrial membrane potential, and membrane lipid peroxidation. Journal of Andrology 21(6): 895-902.
Carvalho, R.K., M.L. Santos, M.R. Souza, T.L. Rocha, F.S. Guimarães, J.A. Anselmo-Franci and R. Mazaro-Costa. 2018. Chronic exposure to cannabidiol induces reproductive toxicity in male Swiss mice. Journal of Applied Toxicology 38(9): 1215-1223.
Jarassaeng, C. 1999. Semen Quality. Department of Surgery and Theriogenology, Faculty of Veterinary Medicine, Khon Kaen University. Khon Kaen. 91 p. (in Thai)
Department of Livestock Development. 2012. Preparation of cattle strategic. (Online). Available: http://extension.dld.go.th/th1/ (June 5, 2021). (in Thai)
El-Sisy, G.A., W.S. El-Nattat and R.I. El-Sheshtawy. 2007. Buffalo semen quality, antioxidants and peroxidation during chilling and cryopreservation. Online Journal of Veterinary Research 11: 55-61.
El-Sisy, G.A., W.S. El-Nattat, R.I. El-Sheshtawy and A.M.A. El-Maaty. 2016. Substitution of egg yolk with different concentrations of soybean lecithin in tris-based extender during bulls' semen preservability. Asian Pacific Journal of Reproduction 5(6): 514-518.
Forouzanfar, M., M. Sharafi, S.M. Hosseini, S. Ostadhosseini, M. Hajian, L. Hosseini and M.H. Nasr-Esfahani. 2010. In vitro comparison of egg yolk–based and soybean lecithin–based extenders for cryopreservation of ram semen. Theriogenology 73: 480-487.
Kadirvel, G., S. Kumar, A. Kumaresan and P. Kathiravan. 2009. Capacitation status of fresh and frozen-thawed buffalo spermatozoa in relation to cholesterol level, membrane fluidity and intracellular calcium. Animal Reproduction Science 116(3-4): 244-253.
Liu, Z. and R.H. Foote. 1998. Bull sperm motility and membrane integrity in media varying in osmolality. Journal of Dairy Science 81(7): 1868-1873.
Padrik, P., T. Hallap, T. Kaart, T. Bulitko and Ü. Jaakma. 2012. Relationships between the results of hypo-osmotic swelling tests, sperm motility, and fertility in Estonian Holstein dairy bulls. Czech Journal of Animal Science 57(10): 490-497.
Patra, P.B. and R.M. Wadsworth. 1991. Quantitative evaluation of spermatogenesis in mice following chronic exposure to cannabinoids. Andrologia 23(2): 151-156.
Payne, K.S., D.J. Mazur, J.M. Hotaling and A.W. Pastuszak. 2019. Cannabis and male fertility: A systematic review. The Journal of Urology: 202(4): 674-681.
Rehman, F.U., C. Zhao, M.A. Shah, M.S. Qureshi and X. Wang. 2013. Semen extenders and artificial insemination in ruminants. Veterinaria 1(1): 1-8.
Rovetto, L.J. and N.V. Aieta. 2017. Supercritical carbon dioxide extraction of cannabinoids from Cannabis sativa L. The Journal of Supercritical Fluids 129: 16-27.
Thun, R., M. Hurtado and F. Janett. 2002. Comparison of Biociphos-Plus® and TRIS-egg yolk extender for cryopreservation of bull semen. Theriogenology 57(3): 1087-1094.
Uavechanichkul, R. 2008. Instruction Manual Control of Semen Quality Artificial Insemination Bull. Bureau of Biotechnology in Livestock Production, Department of Livestock Development, Bangkok. 177 p. (in Thai)
Wadood, F., M. Aleem, A. Ijaz, N. Ahmad, M.S. Yousaf and D.H. Mughal. 2016. Effect of extender osmolality and butylated hydroxy toluene supplementation on post thaw quality and fertility of Nili Ravi buffalo bull (Bubalus bubalis) semen. The Journal of Animal & Plant Sciences 26(3): 605-611.
Zimmerman, D.M., S.E. Smits, M.D. Hynes, B.E. Cantrell, M. Reamer and R. Nickander. 1982. Structural requirements for affinity and intrinsic activity at the opiate receptor defined in 4-phenylpiperidine and related series. pp. 112-118. In: Proceedings of the 41st Annual Scientific Meeting: Problems of Drug Dependence, 1981. The Committee on : Problems of Drug Dependence, Inc., San Francisco, CA.