ฤทธิ์ยับยั้งแบคทีเรียของเชื้อเอนโดไฟติกแอคติโนมัยซีท Streptomyces sp. PM-R01 ที่แยกได้จากทุเรียนพันธุ์พื้นเมืองในจังหวัดจันทบุรี

Main Article Content

วิญญู ภักดี
จิรภัทร จันทมาลี

บทคัดย่อ

ปัญหาการดื้อยาของแบคทีเรียส่งผลกระทบไปทั่วโลก ขณะเดียวกันสถานการณ์ระดับโลกพบว่าการค้นพบยาชนิดใหม่ ๆ มีอัตราที่น้อยลง หนึ่งในแหล่งของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่สามารถพัฒนาเป็นยาได้มาจากเชื้อกลุ่มแอคติโนมัยซีท วัตถุประสงค์ของการวิจัยนี้ทำเพื่อแยกเชื้อเอนโดไฟติกแอคติโนมัยซีทจากทุเรียนพันธุ์พื้นเมืองในจังหวัดจันทบุรีที่มีฤทธิ์ยับยั้งแบคทีเรียบางชนิดได้ และระบุชนิดของแอคติโนมัยซีทนั้น วิธีการศึกษาประกอบด้วยการแยกเอนโดไฟติกแอคติโนมัยซีทจากเนื้อเยื่อทุเรียนด้วยการฆ่าเชื้อที่พื้นผิว จากนั้นทดสอบฤทธิ์ยับยั้งแบคทีเรียเบื้องต้นด้วยวิธีการขีดขวางและเลือกแอคติโนมัยซีทที่มีฤทธิ์ดีที่สุดสำหรับสกัดสารสกัดหยาบเพื่อใช้หาค่าความเข้มข้นต่ำสุดที่สามารถยับยั้งและฆ่าเชื้อแบคทีเรียทดสอบ (MIC และ MBC) ด้วยวิธี Broth microdilution และทำการระบุชนิดแอคติโนมัยซีทด้วยการศึกษาสัณฐานวิทยาและวิเคราะห์ลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีน 16S rRNA ผลการวิจัยพบว่าสามารถแยกเอนโดไฟติกแอคติโนมัยซีทได้ทั้งหมด 10 ไอโซเลท โดยมีเฉพาะเชื้อไอโซเลท PM-R01 ที่สามารถยับยั้งเชื้อ Bacillus cereus TISTR 2372 และ Staphylococcus aureus ATCC 25923 ได้และมีระยะยับยั้งเฉลี่ยเท่ากับ 14.33 ± 2.33 และ 13.00 ± 1.00 mm ตามลำดับ หลังการสกัดสารสกัดหยาบพบว่าสารสกัดมีค่า MIC มากกว่า 1,024 µg/ml และที่ความเข้มข้นเดียวกันนี้สามารถฆ่าเชื้อแบคทีเรียทั้งสองได้ไม่น้อยกว่าร้อยละ 98 เมื่อทำการระบุชนิดพบว่าเชื้อไอโซเลท PM-R01 มีความคล้ายกับเชื้อ Streptomyces ardesiacus NRRL B-1773T ที่ร้อยละ 99.65 ผลการวิจัยทั้งหมดสรุปได้ว่าเชื้อเอนโดไฟติกแอคติโนมัยซีทไอโซเลท PM-R01 ซึ่งคล้ายกับเชื้อ Streptomyces ardesiacus มีศักยภาพในการยับยั้งเชื้อแบคทีเรียแกรมบวกบางชนิดได้ ดังนั้นจึงควรศึกษาและพัฒนาสารสกัดหยาบของเชื้อนี้เพิ่มเติมเพื่อนำไปใช้ประโยชน์ต่อไป

Article Details

ประเภทบทความ
บทความวิจัย

เอกสารอ้างอิง

Asmah, N., Suniarti, D. F., Margono, A., Mas’ud, Z. A., & Bachtiar, E. W. (2020). Identification of active compounds in ethyl acetate, chloroform, and N-hexane extracts from peels of Citrus aurantifolia from Maribaya, West Java, Indonesia. Journal of Advanced Pharmaceutical Technology & Research, 11(3), 107-112.

Bérdy, J. (2005). Bioactive microbial metabolites. The Journal of Antibiotics, 58(1), 1-26. https://doi.org/10.1038/ja.2005.1

Chun, J., & Goodfellow, M. (1995). A Phylogenetic analysis of the genus Nocardia with 16S rRNA gene sequences. International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 45(2), 240-245.

CLSI. (2018). Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically. CLSI Standard M07 (11th ed.). Clinical and Laboratory Standards Institute.

Cook, A. E., & Meyers, P. R. (2003). Rapid identification of filamentous actinomycetes to the genus level using genus-specific 16S rRNA gene restriction fragment patterns. International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 53(6), 1907-1915.

Darya, M., Abdolrasouli, M. H., Yousefzadi, M., Sajjadi, M. M., Sourinejad, I., & Zarei, M. (2022). Antifouling coating based on biopolymers (PCL/PLA) and bioactive extract from the sea cucumber Stichopus herrmanni. AMB Express, 12, 1-12, Article 24. https://doi.org/10.1186/s13568-022-01364-3

Goodfellow, M., Kämpfer, P., Busse, H. J., Trujillo, M. E., Suzuki, K., Ludwig, W., & Whitman, W. B. (2012). Bergey's manual of systematic bacteriology: Volume 5: The Actinobacteria. Springer New York.

Gos, F. M. W. R., Savi, D. C., Shaaban, K. A., Thorson, J. S., Aluizio, R., Possiede, Y. M., . . . Glienke, C. (2017). Antibacterial activity of endophytic actinomycetes isolated from the medicinal plant Vochysia divergens (Pantanal, Brazil). Frontiers in Microbiology, 8, 1-17, Article 1642. https://doi.org/10.3389/fmicb.2017 .01642

Madigan, M. T., Martinko, J. M., Dunlap, P. V., & Clark, D. P. (2009). Brock biology of microorganisms (12th ed.). Pearson/Benjamin Cummings.

Mingma, R., Pathom-aree, W., Trakulnaleamsai, S., Thamchaipenet, A., & Duangmal, K. (2014). Isolation of rhizospheric and roots endophytic actinomycetes from Leguminosae plant and their activities to inhibit soybean pathogen, Xanthomonas campestris pv. glycine. World Journal of Microbiology and Biotechnology, 30(1), 271-280. https://doi.org/10.1007/s11274-013-1451-9

Otoguro, M., Hayakawa, M., Yamazaki, T., & Iimura, Y. (2001). An integrated method for the enrichment and selective isolation of Actinokineospora spp. in soil and plant litter. Journal of Applied Microbiology, 91(1), 118-130. https://doi.org/https://doi.org/10.1046/j.136 5-2672.2001.01372.x

Pankey, G. A., & Sabath, L. D. (2004). Clinical relevance of bacteriostatic versus bactericidal mechanisms of action in the treatment of gram-positive bacterial infections. Clinical Infectious Diseases, 38(6), 864-870. https://doi.org/10.1086/ 381972

Shirling, E. B., & Gottlieb, D. (1966). Methods for characterization of Streptomyces species. International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 16(3), 313-340. https://doi.org/https://doi.org/10.1099/00207713-16-3-313

Suhandono, S., & Utari, I. B. (2014). Isolation and molecular identification of endophytic bacteria from durian arillus (Durio zibethinus Murr.) var. Matahari. Microbiology Indonesia, 8(4), 161-169. https://doi.org/10.5454/mi.8.4.3

Taechowisan, T., Chaisaeng, S., & Phutdhawong, W. S. (2017). Antibacterial, antioxidant and anticancer activities of biphenyls from Streptomyces sp. BO-07: an endophyte in Boesenbergia rotunda (L.) Mansf A. Food and Agricultural Immunology, 28(6), 1330-1346. https://doi.org/10.1080/09540105.2017.1339669

Taechowisan, T., Puckdee, W., & Phutdhawong, W. S. (2019). Streptomyces zerumbet, a novel species from Zingiber zerumbet (L.) Smith and isolation of its bioactive compounds. Advances in Microbiology, 9(3), 194-219. https://doi.org/ 10.4236/aim.2019.93015

Ventola, C. L. (2015). The antibiotic resistance crisis: part 1: causes and threats. Pt, 40(4), 277-283.

Wink, J., Mohammadipanah, F., & Hamedi, J. (2017). Biology and biotechnology of actinobacteria. Springer International Publishing.

World Health Organization. (2022). Global antimicrobial resistance and use surveillance system (GLASS) report 2022. World Health Organization. https://www.who.int/publications/ i/item/9789240062702

Yoshizawa, S., Fourmy, D., & Puglisi, J. D. (1998). Structural origins of gentamicin antibiotic action. The EMBO Journal, 17(22), 6437-6448-6448. https://doi.org/https://doi.org/10.1093/ emboj/17.22.6437