การสร้าง infectious clones และทดสอบความสามารถในการก่อโรคของไวรัสใบหงิกเหลืองพริก

บทคัดย่อ

งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์ในการสร้าง Infectious clones ของเชื้อไวรัสสาเหตุโรคใบหงิกเหลืองพริกที่พบในประเทศไทย และศึกษาความสามารถในการก่อโรคของ Infectious clones ใช้เชื้อ Pepper yellow leaf curl Thailand virus  (PepYLCTHV) ไอโซเลท BRM103 เป็นต้นแบบในการออกแบบไพรเมอร์เพื่อสร้าง infectious clones โดยการโคลน DNA-A และ DNA-B fragments เข้าสู่ pRI101 binary vector ถ่ายฝาก recombinant plasmid เข้าสู่ Agrobacterium tumefaciens สายพันธุ์ LBA4404 ผลจากการทดสอบความสามารถในการก่อโรคโดยใช้ยาสูบ (Nicotiana benthamiana) และพริก (Capsicum spp.) เป็นพืชทดสอบด้วยวิธี Agroinoculation พบว่า พืชทั้งสองชนิดสามารถแสดงอาการใบหงิกเหลืองซึ่งเป็นอาการที่เกิดจากเชื้อเบโกโมไวรัสได้ โดยมีเปอร์เซ็นต์การติดเชื้อ 100% และ 10% ตามลำดับ ซึ่งพบอาการของโรคเฉพาะในกรรมวิธีที่ปลูกเชื้อด้วย pRI101DNA-A ร่วมกับ pRI101DNA-B เท่านั้น ผลจากงานวิจัยจึงเป็นอีกทางเลือกหนึ่งของการถ่ายทอดเชื้อไวรัส PepYLCTHV นอกจากการใช้แมลงพาหะ ซึ่งเป็นประโยชน์ต่อการศึกษาวิจัยเกี่ยวกับเชื้อไวรัสชนิดนี้และสามารถนำไปประยุกต์กับการปรับปรุงพันธุ์พืชให้ต้านทานโรคใบหงิกเหลืองพริกได้ต่อไป