การคัดเลือกสายพันธุ์บริสุทธิ์เห็ดถังเช่าทิเบต (Ophiocordyceps sinensis) จากดอกเห็ดถังเช่าทิเบตแห้งที่มาจากประเทศจีน
คำสำคัญ:
การคัดแยกสายพันธุ์ , การระบุสายพันธุ์ , ลักษณะสัณฐานวิทยา , เห็ดถังเช่าทิเบตบทคัดย่อ
เห็ดถังเช่าทิเบต (Ophiocordyceps sinensis) เป็นเห็ดทางการแพทย์ที่มีการใช้ในยาแผนโบราณของจีนมายาวนาน ด้วยองค์ประกอบสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพหลัก คือ โพลิแซ็คคาไรด์ คอร์ไดเซปิน และอะดีโนซีน ซึ่งมีส่วนช่วยในการบำรุงร่างกายและมีฤทธิ์ทางเภสัชวิทยา ที่โดดเด่น กล่าวคือ สามารถต้านมะเร็ง กระตุ้นภูมิคุ้มกัน ต้านอนุมูลอิสระ และลดน้ำตาลในเลือด ซึ่งดอกเห็ดดังกล่าวเป็นที่ต้องการและมีมูลค่าทางการตลาดสูง ทำให้เกิดวิกฤตวัตถุดิบจากธรรมชาติไม่เพียงพอ การเพาะเลี้ยงเส้นใยเพื่อทดแทนดอกเห็ดจึงถูกนำมาใช้ตอบสนองความต้องการของตลาด
การศึกษาครั้งนี้เพื่อให้ได้สายพันธุ์ราเห็ดถังเช่าทิเบตบริสุทธิ์ที่ถูกต้อง โดยใช้การวิเคราะห์ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของรา การวิเคราะห์ลำดับนิวคลีโอไทด์ และการวิเคราะห์สายวิวัฒนาการ จากการรวบรวมดอกเห็ด ถังเช่าทิเบตแห้งในธรรมชาติหลากหลายแหล่งที่มาจากประเทศจีน โดยใช้ทั้งส่วนของราที่งอกออกจากหัวหนอน (Stroma) และส่วนที่เป็นตัวหนอน (Sclerotium) ผลการวิจัยดังกล่าวพบว่ามีเพียง 1 ไอโซเลท ที่มีลักษณะโคโลนีและรูปร่างสัณฐานวิทยาที่คล้ายคลึงกับราเห็ด
ถั่งเช่าทิเบต และทำการยืนยันด้วยเทคนิคทางชีววิทยาโมเลกุลโดยเปรียบเทียบลำดับนิวคลีโอไทด์ของไรโบโซมนิวเคลียสด้วยไพรเมอร์ ITS4 (5′-TCCTCCGCT TATTTGATATGC-3′) และ ITS5 (5′-GGAAGT AAAAGTCGTAACAAGG-3′) พบว่าราดังกล่าว คือ Ophiocordyceps sinensis เมื่อทำการเทียบสายวิวัฒนาการ (Phylogenetic tree) พบว่า O. sinensis ดังกล่าวอยู่ในวงศ์ Ophiocordycipitaceae
การเลี้ยงราสายพันธุ์บริสุทธิ์ดังกล่าว สามารถเลี้ยงในอาหารวุ้นสูตร เพปโตน 10 กรัม เด็กซ์โทรส 40 กรัม ยีสต์สกัด 20 กรัม ผงวุ้น 15 กรัม และน้ำกลั่น 1 ลิตร ที่อุณหภูมิ 16 องศาเซลเซียส ในที่มืด เป็นเวลา 14 วัน โดยมีลักษณะโคโลนีที่ตรงกลางมีสีขาวถึงสีครีมอ่อนและรูปร่างกลม มีลักษณะของเส้นใยที่มีสีขาวขนนกซ้อนกันอย่างหนาแน่น เส้นใยแตกเป็นข้อแขนง มีเส้นใยอากาศปุยฟู และมีสปอร์รูปแท่งยาว 5-10 ไมโครเมตร ดังนั้นสายพันธุ์ราบริสุทธิ์ที่ได้จะสามารถใช้เป็นหัวเชื้อสำหรับการตรวจหาสารออกทธิ์ทางชีวภาพและทดสอบการออกฤทธิ์ทางเภสัชวิทยาต่อไป
References
Bhardwaj, N., S. Rajaura, P. Chauhan and A. Singh. 2023. Metabolomics and Therapeutic Potential of Ophiocordyceps sinensis. pp. 319-342. In Phytochemical Genomics: Plant Metabolomics and Medicinal Plant Genomics. Singapore: Springer.
Bhetwal, S., S. Chatterjee, R.R. Samrat, M. Rana and S. Srivastava. 2021. Cordyceps sinensis: Peculiar caterpillar mushroom, salutary in its medicinal and restorative capabilities. The Pharma Innovation Journal 10(4): 1045-1054.
Cao, L., Y. Ye and R. Han. 2015. Fruiting body production of the medicinal Chinese caterpillar mushroom, Ophiocordyceps sinensis (Ascomycetes), in artificial medium. International Journal of Medicinal Mushrooms 17(11): 1521-9437.
Chioza, A. and S. Ohga. 2014. A review on fungal isolates reported as anamorphs of Ophiocordyceps sinensis. Journal of Mycology 913917. [Online]. Available https://doi.org/10.1155/2014/913917.
Dong, C., S. Guo, W. Wang and X. Liu. 2015. Cordyceps industry in China. Mycology. 6(2): 121-129.
Kandeel, M., M.E. Mohamed, H. M. Abd El‐Lateef, K.N. Venugopala and H.S. El‐Beltagi. 2022. Omicron variant genome evolution and phylogenetics. Journal of Medical Virology 94(4): 1627-1632.
Ko, Y.-F., J.-C. Liau, C.-S. Lee, C.-Y. Chiu, J. Martel, C.-S. Lin, S.-F. Tseng, D.M. Ojcius, C.-C. Lu and H.-C. Lai. 2017. Isolation, culture and characterization of Hirsutella sinensis mycelium from caterpillar fungus fruiting body. PloS One 12(1): e0168734.
Leung, P., Q. Zhang and J. Wu. 2006. Mycelium cultivation, chemical composition and antitumour activity of a Tolypocladium sp. fungus isolated from wild Cordyceps sinensis. Journal of Applied microbiology 101(2): 275-283.
Li, C., Z. Li, M. Fan, W. Cheng, Y. Long, T. Ding and L. Ming. 2006. The composition of Hirsutella sinensis, anamorph of Cordyceps sinensis. Journal of Food Composition and Analysis 19(8): 800-805.
Liu, Y., J. Wang, W. Wang, H. Zhang, X. Zhang and C. Han. 2015. The chemical constituents and pharmacological actions of Cordyceps sinensis. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine 575063. DOI:10.1155/2015/575063 (April 16, 2015).
Liu, Z.-Q., S. Lin, P.J. Baker, L.-F. Wu, X.-R. Wang, H. Wu, F. Xu, H.-Y. Wang, M.E. Brathwaite and Y.-G. Zheng. 2015. Transcriptome sequencing and analysis of the entomopathogenic fungus Hirsutella sinensis isolated from Ophiocordyceps sinensis. Bmc Genomics 16:106. DOI: 10.1186/s12864-015-1269-y (February 21, 2015).
Pang, L.-Y., S.-M. Then, K.-H. Lim, K.-N. Ting and S.-Y. Fung. 2023. Biopharmaceutical Potential of Ophiocordyceps sinensis for Human Health. pp. 189-219. In Mushrooms with Therapeutic Potentials: Recent Advances in Research and Development. Singapore: Springer.
Sharma, S. and S. Kumar. 2021. Fast and accurate bootstrap confidence limits on genome-scale phylogenies using little bootstraps. Nature Computational Science 1(9): 573-577.
Shreedevasena, S., L. Karthiba, R. Raveena, S. Ramyabharathi, E.A. Salama, J. Mohanraj, S. Vanitha, P. Anantha Raju, A. Kamalakannan and P. Jeyakumar. 2022. Mass Production and Marketing of Compost Caterpillar Fungus Cordyceps sinensis. pp. 239-263.
In Industrial Microbiology Based Entrepreneurship: Making Money from Microbes. Berlin: Springer Nature.
Tamura, K., M. Nei and S. Kumar. 2004. Prospects for inferring very large phylogenies by using the neighbor-joining method. PNAS 101(30) 11030-11035.
Wei, Y., L. Zhang, J. Wang, W. Wang, N. Niyati, Y. Guo and X. Wang. 2021. Chinese caterpillar fungus (Ophiocordyceps sinensis) in China: current distribution, trading, and futures under climate change and overexploitation. Science of The Total Environment 755(2021): 142548. DOI:10.1016/ j.scitotenv.2020.142548.
Wu, T.-R., C.-S. Lin, C.-J. Chang, T.-L. Lin, J. Martel, Y.-F. Ko, D. M. Ojcius, C.-C. Lu, J.D. Young and H.-C. Lai. 2019. Gut commensal Parabacteroides goldsteinii plays a predominant role in the anti-obesity effects of polysaccharides isolated from Hirsutella sinensis. Gut. 68(2): 248-262.
Xia, F., X. Chen, M.-Y. Guo, X.-H. Bai, Y. Liu, G.-R. Shen, Y.-L. Li, J. Lin and X.-W. Zhou. 2016. High-throughput sequencing-based analysis of endogenetic fungal communities inhabiting the Chinese cordyceps reveals unexpectedly high fungal diversity. Scientific Reports 6(1): 33437.
Yan, J.-K., L. Li, Z.-M. Wang and J.-Y. Wu. 2010. Structural elucidation of an exopolysaccharide from mycelial fermentation of a Tolypocladium sp. fungus isolated from wild Cordyceps sinensis. Carbohydrate Polymers 79(1): 125-130.
Yu, Y., W. Wang, L. Wang, F. Pang, L. Guo, L. Song, G. Liu and C. Feng. 2016. Draft genome sequence of Paecilomyces hepiali, isolated from Cordyceps sinensis. Genome Announcements 4(4): e00606-00616.
Zhang, Y., E. Li, C. Wang, Y. Li and X. Liu. 2012. Ophiocordyceps sinensis, the flagship fungus of China: terminology, life strategy and ecology. Mycology 3(1): 2-10.
Zhang, Y., S. Zhang, M. Wang, F. Bai and X. Liu. 2010. High diversity of the fungal community structure in naturally-occurring Ophiocordyceps sinensis. PLoS One 5(12): e15570.
Downloads
เผยแพร่แล้ว
How to Cite
ฉบับ
บท
License
Copyright (c) 2024 วารสารวิจัยและส่งเสริมวิชาการเกษตร
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.
บทความนี้ได้รับการเผยแพร่ภายใต้สัญญาอนุญาต Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International (CC BY-NC-ND 4.0) ซึ่งอนุญาตให้ผู้อื่นสามารถแชร์บทความได้โดยให้เครดิตผู้เขียนและห้ามนำไปใช้เพื่อการค้าหรือดัดแปลง หากต้องการใช้งานซ้ำในลักษณะอื่น ๆ หรือการเผยแพร่ซ้ำ จำเป็นต้องได้รับอนุญาตจากวารสาร