<I>Agrobacterium</I>-Mediated Transformation of <I>Cry1Ac </I>Gene to Tobacco (<I>Nicotiana tabacum</I>) and Evaluation of <I> Heliothis armigera </I>Resistance
Article Sidebar
Main Article Content
บทคัดย่อ
การถ่ายยีนเข้าสู่พืชโดยผ่านทางเชื้อ Agrobacterium เป็นที่ยอมรับในกระบวนการทางพันธุวิศวกรรมทางด้านพืช ในการทดลองนี้ใช้ชิ้นส่วนของใบยาสูบพันธุ์ K326 มาเลี้ยงร่วมกับ A. tumefaciens สายพันธุ์ EHA ที่มี พลาสมิด pITB2 ที่ได้รับการสอดถ่ายยีน Cry1Ac, bar และ GUS ซึ่งเป็นยีนที่ควบคุมการสร้างสารพิษต่อแมลง ยีนต้านทานต่อสารปราบวัชพืชและยีนรายงาน หรือใช้ตรวจสอบตามลำดับ หลังจากการเลี้ยงชิ้นใบยาสูบในอาหาร พบว่า ยอดที่มีลักษณะต้านทานต่อสารปราบวัชพืช phosphinothricin และมีการแสดงผลของ GUS ยีนพัฒาจากส่วนของชิ้นใบ เมื่อนำยอดที่ได้มาตรวจสอบการแสดงออกของยีน Cry1Ac โดยวิธี Western Blot และการนำหนอนเจาะสมอฝ้ายมาเลี้ยงบนใบยาสูบที่ได้รับการถ่ายยีน ผลการทดลองแสดงว่า ยาสูบที่ได้รับการถ่ายยีนสามารถป้องกันการกัดกินของหนอนได้ทำให้ความเสียหายอันเนื่องจากการทำลายของหนอนลดลงอย่างชัดเจน
Article Details
References
Barton, K.A., H.R. Whiteley and N.S. Yang. 1987. Bacillus thuringinesis delta-endotoxin expressed in transgenic Nicotiana tobacum provides resistance to lepidopteran insects. Plant Physiol. 85(4): 1103-1109.
Bhau, B.S. and V. Koul. 1998. Switching on Bacillus thuringiensis to reduce selection for resistance. Current Science 75(8): 771-777.
Cheng X., R. Sardana, H. Kaplan and I. Altosaar. 1998. Agrobacterium-transformed rice plants expressing synthetic cry1A(b) and cry1A(c) genes are highly toxic to striped stem borer and yellow stem borer. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 95(6): 2767–2772.
Krattiger, A.F. 1997. Insect Resistance in Crops: A Case Study of Bacillus thuringiensis (Bt) and its Transfer to Developing Countries. ISAAA Briefs No. 2. ISAAA. Ithaca, NY. 42 pp.
Nayak, P., D. Basu, S. Das, A. Basu, D. Ghosh, N. A. Ramakrishnan, M. Ghosh and S. K. Sen. 1997. Transgenic elite indica rice plants expressing Cry1Ac -endotoxin of Bacillus thuringiensis are resistant against yellow stem borer (Scirpophaga incertulas) Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 94(6): 2111–2116.
Sardana, R., S. Dukiandjiev, M. Giband, X. Cheng, K. Cowan, C. Sauder and I. Altosaar. 1996. Construction and rapid testing of synthetic and modified toxin gene sequences cry1A(b&c) by expression in maize endosperm culture. Plant Cell Reports. 15: 677-681.
Vaeck, M., A. Reynaerts, H. Hofte, S. Jansens, M. De Beuckeleer, C. Dean, M. Zabeau, M. van Montagu and J. Leemans 1987. Transgenic plants protected from insect attack. Nature 328: 33-37.