การศึกษาการใช้สารเคมีเพื่อยับยังจุลินทรีย์ปนเปื้อนและผลต่อการเจริญเติบโต ของเนื้อเยื่ออ้อยในระบบเปิด
DOI:
https://doi.org/10.14456/jare-mju.2025.6คำสำคัญ:
อ้อย , สารควบคุมจุลินทรีย์ , การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อต้นทุนต่ำ , การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อแบบระบบเปิดบทคัดย่อ
การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อหาชนิดและความเข้มข้นของสารฆ่าเชื้อต่อการยับยังเชื้อจุลินทรีย์ ในสภาพห้องปฏิบัติการ และเหมาะสมต่อการเจริญเติบโตของเนื้อเยื่ออ้อย โดยในขั้นตอนแรกทำการคัดกรองหาเชื้อจุลินทรีย์ที่พบปนเปื้อนในอาหารเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อสูตร MS ในสภาพห้องปฏิบัติการระบบเปิด (เดือนพฤศจิกายน 2563) พบเชื้อรา 8 ไอโซเลท ได้แก่ Aspergillus sp., Trichoderma sp., Fusarium sp., Gliocladium sp., Curvularia sp., ยีสต์และอีก 2 ไอโซเลทไม่ทราบชื่อ เนื่องจากไม่สร้างหน่วยขยายพันธุ์ และเชื้อแบคทีเรีย 5 ไอโซเลท ได้แก่ แบคทีเรียแกรมบวก 1 ไอโซเลท แบคทีเรียแกรมลบ 4 ไอโซเลท จากนั้นทดลองหาชนิดของสารฆ่าเชื้อที่ระดับความเข้มข้นต่าง ๆ เพื่อควบคุมจุลินทรีย์แต่ละชนิดที่คัดกรองได้จากการปนเปื้อน ในอาหารเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อสูตร MS พบว่า Sodium hypochlorite ความเข้มข้น 0.17, 0.25 และ 0.33 มิลลิลิตร/ลิตร สามารถควบคุมการปนเปื้อนเชื้อจุลินทรีย์ได้ดี ในการทดลองเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่ออ้อยในอาหารสูตร MS ที่ไม่ได้นึ่งฆ่าเชื้อ เติมไคเนติน 1 มิลลิกรัม/ลิตร กรดซิตริก 150 มิลลิกรัม/ลิตร ร่วมกับสารเคมี Sodium hypochlorite ความเข้มข้น 0.20, 0.25 และ 0.33 มิลลิลิตร/ลิตร พบการเจริญเติบโตและการพัฒนาของเนื้อเยื่ออ้อยที่ดี และไม่แตกต่างจากการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อแบบดั้งเดิม
References
Balla, N., N. Chanchula, T. Weeplian, B. Nuntha, N. Nunya, S. Pokaew and S. Kashima. 2022. Sterilization methods to prevent contamination in MS medium for the tissue culture of philodendron “Cherry Red”. Wichcha Journal Nakhon Si Thammarat Rajabhat University 41(1): 119-129. [in Thai]
Bennett, E.J., R. Dolin and J.M. Blaser. 2015. Principles and Practice of Infectious Diseases. 8th Ed. Amsterdam: Elsevier Inc. 3697 p.
Chotikadachanarong, K. 2015. Simple media from hydroponics nutrient solution for tissue culture of Exacum affine Balf.f.ex Regel and Stevia rebaudiana Bertoni. Asian Health, Science and Technology Reports 23(1): 74-81. [in Thai]
Chotikadachanarong, K. 2013. Influence of commercial bleach on sterilization of Persian Violet (Exacum affine Balf. f. ex Regel) tissue culture media. Rajabhat Journal of Sciences Humanities and Social Sciences 14(2): 35-44. [in Thai]
Deein, W., C. Thepsithar and A. Thongpukdee. 2013. In vitro culture medium sterilization by chemical and essential oils without autoclaving and growth of chrysanthemum nodes. World Academy of Science, Engineering and Technology 7: 1041-1044.
Kaewmenee, C., and Y. Hanboonsong. 2011. Evaluation of the effciency of various treatments used for sugarcane white leaf phytoplasma control. Bulletin of Insectology 64: 197-198.
Kaewpratumrussamee, C., R. Koohapitakthum, O. Chatchawankanpanich, H. Chachiyo and A. Wongcharoen. 2015. A suitable culture medium for micropropagation of sugarcane (Saccharum officinarum L.) in vitro. KKU Science Journal 43(Suppl.1): 170-175. [in Thai]
Lantagne, D.S., B.C. Blount, F. Cardinali, and R. Quick. 2008. Disinfection by-product formation and mitigation strategies in point-of-use chlorination of turbid and non-turbid waters in Western Kenya. Journal of Water and Health 6(1): 67-82.
Leifert, C., B. Waites, J.W. Keetley, S.M Wright, J.R. Nicholas and W.M. Waites. 1994. Effect of medium acidification on filamentous fungi, yeasts and bacterial contaminants in Delphinium tissue cultures. Plant Cell, Tissue and Organ Culture 36: 149-155.
Murashige, T. and F. Skoog. 1962. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures. Physiol Plant 15(3): 473-497.
Odutayo, O.I., N.A. Amusa, O.O. Okutade and Y.R. Ogunsanwo. 2007. Determination of the sources of microbial contaminations of cultured plant tissues. Plant Pathology Journal 6(1): 77-81.
Rangkawe, P. and R. Koto. 2016. Effects of chemical and microwave techniques on sterilization of medium and materials plant tissue culture and subculture without using laminar air flow cabinet. Science Journal SWU 32(2): 161-175. [in Thai]
Reed, B.M. and P. Tanprasert. 1995. Detection and control of bacterial contaminants of plant tissue cultures: a review of recent literature. Plant Tissue Culture and Biotechnology 1(3): 137-142.
Sawant, R. and P. Tawar. 2011. Use of sodium hypochlorite as media sterilant in sugarcane micropropagation at commercial scale. Sugar Tech 13(1): 27-35.
Tiwari, A., S. Tripathi, M. Lal and S. Mishra. 2012. Screening of some chemical disinfectants for media sterilization during in vitro micropropagation of sugarcane. Sugar Tech 14(4): 364-369.
Wamaedeesa, R., B. Ali, N. Chedao and S. Kanjanawattanawong. 2021. Chemical sterilization in MS culture medium for In vitro culture of Philodendron sp. “Ruaysap”. Princess of Naradhiwas University Journal 13(1): 377-387.
Downloads
เผยแพร่แล้ว
How to Cite
ฉบับ
บท
License
Copyright (c) 2025 วารสารวิจัยและส่งเสริมวิชาการเกษตร

This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.
บทความนี้ได้รับการเผยแพร่ภายใต้สัญญาอนุญาต Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International (CC BY-NC-ND 4.0) ซึ่งอนุญาตให้ผู้อื่นสามารถแชร์บทความได้โดยให้เครดิตผู้เขียนและห้ามนำไปใช้เพื่อการค้าหรือดัดแปลง หากต้องการใช้งานซ้ำในลักษณะอื่น ๆ หรือการเผยแพร่ซ้ำ จำเป็นต้องได้รับอนุญาตจากวารสาร