การผลิตแอนติบอดีย์ต่อต้านฮอร์โมนเพื่อการวิเคราะห์เรดิโออิมมูนโนแอสเซ 1. การเปรียบเทียบการผลิตแอนติบอดีย์ต่อต้านฮอร์โมนโปรเจสเตอร์โรนในไก่, กระต่าย และหนูตะเภา
Article Sidebar
Main Article Content
บทคัดย่อ
เป้าหมายของการทดลองเป็นการพัฒนาเทคนิคการผลิตแอนติบอดีย์ (Antibody) ต่อต้านฮอร์โมนโปรเจสเตอร์โรน (Progesterone) จากไก่ไข่, กระต่าย และ หนูตะเภา (Guinea Pig) ด้วยแอนติเจน (Antigen) ชนิด11 Alpha-Hydroxyprogesterone hemisuccinate-Bovine Serum Albumin ที่เตรียมขึ้นเองในห้องปฏิบัติการ และสั่งซื้อจากบริษัท. ทำการทดลองที่ภาควิชาสัตวบาล, คณะเกษตรศาสตร์, มหาวิทยาลัยเชียงใหม่. สัตว์ทดลองเป็นไก่ไข่สายพันธุ์ ISA Brown 9 ตัว, กระต่ายลูกผสมพื้นเมือง x นิวซีแลนด์ไวท์ 9 ตัว และ หนูตะเภา (Guinea pig) 9 ตัว. แบ่งสัตว์ทดลองแต่ละชนิดเป็น 3 กลุ่มๆ ละ 3 ตัว กลุ่มการทดลองประกอบด้วย กลุ่มควบคุม, กระตุ้นด้วยแอนติเจนที่เตรียมขึ้นเอง (Conjugate P) และแอนติเจนที่สั่งซื้อจาก บริษัท (Conjugate S), การกระตุ้นใช้แอนติเจน 20 ไมโครกรัม ในสารละลาย PBS + Freund’s Complete Adjuvant (FCA) (อัตราส่วน 1: 2) ต่อครั้ง จำนวน 4 ครั้ง ระยะเวลาห่างกัน 2 สัปดาห์. ผลปรากฏว่า กระต่ายมีการผลิตแอนติบอดีย์ได้มากกว่าไก่ไข่และหนูตะเภา. กระต่ายและไก่ไข่ตอบสนองต่อ Conjugate P ได้ดีกว่า Conjugate S แต่หนูตะเภาตอบสนองต่อ Conjugate s ได้ดีกว่า Conjugate P. อย่างไรก็ตามโดยภาพรวมสัตว์แต่ละชนิดมีความเหมือนกันที่บางตัวตอบสนองต่อแอนติเจนได้ดี ในขณะที่บางตัวตอบสนองน้อยมาก
Article Details
References
Cox, R.I. and Wilson, P.A. (1976). Effects of immunizing sheep to steriod oestrogens and phyto- oestrogens. J. Reprod. Fert. 46: 524.
Cox, R.I. and Wilson, P.A., Scaramuzzi, R.J., Hoskinson, R.M., George, J.M. and Bindon, B.M. (1982). The active immunization of sheep against oestrone, androstenedione or testosterone to increase twinning. Proc. Aust. Soc. Anim. Prod. 14: 511-514.
Dobson, H. (1983). A Radioimmunoassay Laboratory Handbook. Liverpool University Press, Liverpool.
Erlanger, B.F., Borek, F., Beiser, S.M. and Lieberman, S. (1957). Steriod-protein conjugates. I. Prepa- ration and characterization of conjugates of bovine serum albumin with testosterone and with cortisone. J. Biol. Chem. 228: 713-727.
Erlanger, B.F., Borek, F., Beiser, S.M. and Lieberman, S. (1959). Steriod-protein conjugates. II. Preparation and characterization of conjugates of bovine serum albumin with progesterone, deoxycorticosterone, and estrone. J. Biol. Chem. 234: 1090-1094.
Henricks, D.M. and Mayer D.T. (1977). Gonadal hormones and uterine factors. In: Reproduction in Domestic Animals. Cole, H.H. and Cupps, P.T. (eds.). Academic Press, New York. p. 79-117. International Atomic Energy Agency. (1984). Laboratory Training Manual on Radioimmunoassay in Animal Reproduction. Technical Reports Series No. 233. IAEA, Vienna.
Kamonpatana, M., Timsard, V., Pansin, C. and Cox, R.I. (1985). Steriod immunization in the swamp buffalo: Potential for subfertile recovery. Buffalo J. 1: 53-60.
Lindner, H.R., Perel, E., Friedlander, A. and Zeitlin, A. (1972). Specificity of antibodies to ovarian hormones in relation to the site of attachment of the steroid hapten to the peptide carrier. Steriods 19: 357-375.
Quirke, J.F., Hanrahan, J.P., Tait, A.J. and Kilpatrick, M.J. (1986). Effects of active immunization against androstenedione on ovulation rate and fecundity in Galway and Finish Landrace sheep. Livest. Prod. Sci. 15: 27-37.
Reeves, J.J. (1987). Endocrinolgy of reproduction. In: Reproduction in Farm Animals. Hafez, E.S.E. (ed.). Lea and Febiger, Philadelphia. p. 85-129.
Vaitukaitis, J., Robbins, J.B., Nieschlag, E. and Ross, G.T. (1971). A method for producing specific antisera with small doses of immunogen. J. Clin. Endocr. 33: 988-991.
Zarrow, M.X., Yochim, J.M., Mc Carthy, J.L. and Sanborn, R.C. (1964). Experimental Endocrinology: A Sourcebook of Basic Techniques. Academic Press, New York. p. 65-108.